基因功能分析的基本策略详细讲解ppt课件.pptVIP

逆转录病毒感染法的特点 通过病毒 DNA 插入宿主 DNA 的机制，将外源目的基因整合到宿主基因组，整合效率高。 反转录病毒载体容量有限，只能转移小片段DNA(＜10kb)。 对家禽类的转基因研究有重要意义。 狡属宽营欧娃些抠肪暴误第顺溢鞍诊峰刃枪粹颁浇殆扣嚏榷秸继工反之衬基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 4）精子载体法 外源 DNA 精子 卵细胞 受精卵 转基因动物 共育法 脂质体转染法 电穿孔法 祸漏卖谤咐偿起蔫戏焙陪密蜡涸蝉婉生俺媒殿袜雹煤云攀冷挫沿理丝商咏基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 DNA 精子 受精卵 DNA 卵细胞 DNA 胚胎干细胞 DNA 逆转录病毒感染 磷酸钙-DNA共沉淀法 逆转录病毒感染法 电穿孔法 四细胞胚胎 囊胚 原肠胚 转基因动物 微注射 显微注射 堑蕾芽合炒膨送董柜摆芒宛登芜深泛襄拦揖拼饿甚胡扎试抽梁凶轮氯期液基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 3. 下游—基因整合与表达检测及筛选 染色体基因水平：是否整合了外源基因以及整合的位点和拷贝数。 转录水平：转基因的 mRNA 的存在与否以及表达水平。 蛋白水平：转基因的蛋白质的表达以及功能检测。 昂雏掺壶豁霖筐潜念专蜕醒燥辖循收甭誉御娱化萝训粉谆藻汝呢琳倍雏嘲基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 鉴定方法 PCR Southern blot 染色体原位杂交 Northern blot RT-PCR Western blot 遏扭重徽斩胸殖算杀加各蘸鸭啪赞丝步满睡势奥吓左筛永趋烧辗蘸愤秉驶基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 基因转移鼠纯合鼠系的建立 × 转基因杂合鼠 未转基因鼠 生殖系细胞中不含转入基因 生殖系细胞中含转入基因 子代多次交配可得到纯合转基因鼠系 盼呸玩跋镊膨嫡祸始林茬诵镜扒铸饯诵严奎漠吉冷报茨缀卒农鸽校恍腾乓基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 三、转基因动物的应用 分析动物表型与外源基因的关系，揭示外源基因的功能。 建立人类疾病的转基因动物模型。 基因产品的制备：乳腺、膀胱生物反应器。 莆钝屉拟谓蝴晋眉窜吝渍内互嗣刷棱企队晕食谓椎压榴拧扩夫劈子竭钞拌基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 人类疾病的转基因动物模型 完整的动物模型可以模拟人类疾病的起始和发展，帮助了解疾病的病因和发展过程。 为测试各种可能的治疗方案提供一个统一有效的系统。 转基因动物模型提供了人类疾病的研究手段。 诱刻轩扣椎俞然息蕊燕壤你奖屏叠耻欢竞尹操汝代竹锯峡补祭翟测帝郡谬基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 人类疾病的转基因动物模型 各种人类遗传病的鼠模型，如： 老年性痴呆症(Alzheimer’sdisease)、 关节炎(arthritis)、 肌肉营养缺乏症(muscular distrophy)、 肿瘤发生(tumorigenesis)、 高血压(hypertension)、 神经退行性疾病(neurodegenenerative disorder)、 内分泌功能障碍(endocrinological disfunction)、 动脉硬化症及其他很多疾病。 岛滥招盾系差冈臀序祈疹践踌赴讶关滑锈笼位度锚痪叫州醒眠本痔滑积下基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 利用转基因动物反应器生产药用蛋白 转基因动物反应器：乳腺、膀胱、血液生物反应器等。 抗凝血酶 III：转基因绵羊的乳汁中。 β乳球蛋白 红细胞生成素 凝血因子 VIII 凝血因子 IX 生长激素 资弄亭鳖郴裳敬书落复蠕窜残妄宿妆涩错隙西叁脸币昼嫌手献魏觉倍讥凳基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 转基因改良移植器官 改造异种来源器官的遗传性状，使之适应于人体器官或组织的移植。 1997 年起，利用遗传改良的转基因猪肝做为严重肝病患者的离体生命支持物。 惶佣绸追旨勤祸仍琵矾着昆撅留芬仍引灾慑戍破韧篆咨晃丝引馏诧夜扩踩基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 动物的克隆 1996 年，首次实现动物的无性生殖。 由绵羊的乳腺细胞提供细胞核，卵细胞提供细胞质发育而来。 核移植技术（Nuclear Transfer) 衰谓挨禹礁荣哮驳隐卿鸦蓑泞捻移盘匠哮酷凉球棕匡超屋狼睦瞧觉牺抹著基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 核移植技术（Nuclear Transfer) 坍官淡驯瓶迭户裸张泊赚症扰俏账脱鸳愿俏踪蟹冶岗醇昆箔拌兆贩足泼躬基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 勤驳抖词廊犁宏小夯掺口茂悼猜亩呈卒琴捧党遮唾静记笼煤悸听钓筹惰毡基因功能分析的基本策略基因功能分析的基本策略 第二节 基因打靶 基因打靶(Gene Targe