没食子鞣质对变形链球菌致龋机制作用的分析-analysis of the effect of gallic tannins on the cariogenic mechanism of streptococcus mutans.docxVIP

中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文译名S.mutansStreptococcimutans变形链球菌GTFglucosyltransferases葡萄糖基转移酶LDH1actatedehydrogenase乳酸脱氢酶WSGWater-solubleglucan水溶性多糖WIGWater-insolubleglucan水不溶性多糖MICMinimalinhibitoryconcentration最小抑菌浓度MBCMinimalbactericidalconcentration最小杀菌浓度MBECMinimalbiofilmeradicationconcentration生物膜生长抑制浓度RT-PCRReversetranscriptivepolymerasechainreaction逆转录-多聚酶链反应RT-qPCRreal-timequantitativepolymerasechainreaction实时荧光-定量多聚酶链反应论文独创性说明本人申明所呈交的学位论文是在我个人在导师的指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：签字日期：导师签名：签字日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解学校关于保留、使用学位论文的各项规定，（选择“同意/不同意”）以下事项：1.学校有权保留本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文；2.学校有权将本人的学位论文提交至清华大学“中国学术期刊(光盘版)电子杂志社”用于出版和编入CNKI《中国知识资源总库》或其他同类数据库，传播本学位论文的全部或部分内容。学位论文作者签名：签字日期：导师签名：签字日期：前言龋病是人类最常见的口腔疾病，对龋病防治的研究一直是口腔领域艰巨而重要的课题。国内外学者进行了多种防龋措施的实验研究，如，抗生素，氟化物，化学制剂，免疫防龋等。但这些方法存在诸多局限性及不足之处（抗生素可引起口腔及肠道菌群比例失调，导致耐药株的产生；氟化物防龋中氟浓度的确定及稳定性等方面的问题尚未解决；洗必泰易着色以及引起口腔生态环境改变；免疫防龋面临着增强免疫原性、以及人体应用的安全问题[1-3]。），为寻找安全、有效、经济的防龋药物是龋病防治的重点。天然药物因其毒副作用小，取材方便和经济，在龋病防治中的作用日益受到重视，许多天然药物都具有较强的防龋作用[4]。据国内外文献报道，许多植物药如厚朴、五倍子、桂皮、穿心莲、乌龙茶、黄连等对可疑致龋菌有明显的抑制作用。不同地区的地形、土壤、气候等条件，形成了不同特色的天然药材。在全球四大长寿区之一的新疆，没食子是维药防龋的代表药物，维药健齿的古方和理论为维药防龋研究奠定了基础，没食子具有收敛止汗、抗菌抑菌、抗病毒、清除自由基和抗氧化的作用。但由于在以往的研究中没食子多为简单的粗糙剂型，其中所含的药物成分种类繁多，结构复杂，机理未明，研究内容不够系统深入，缺乏对比，手段简单，因此尚未得到国际的认可与广泛推广。研究组自年1999年起，运用有效成分与整体药效并重的思路，采用现代化科学技术，率先完成了没食子粗提物和有效成分的提取分离、化学成分研究、化合物结构鉴定[5-6]，为实验药物的药理机制研究奠定了基础。龋病是与牙菌斑生物膜、食物、宿主等多因素相关性疾病，其中牙菌斑生物膜是龋病发生所依赖的微环境[7]，变形链球菌（Streptococcusmutans）是目前公认的主要致龋菌群[8]，致龋菌的基本生物学特征包括：1）产酸性和耐酸性，变形链球菌发酵碳水化合物产酸并且能在低pH值环境中继续存活，只有即产酸又耐酸的细菌才能致龋；2）产糖，变形链球菌合成多糖的能力与其致龋性密切相关，变链菌以碳水化合物为底物合成细胞外多糖，特别是水不溶性多糖，有利于细菌的定植及介导其他细菌在牙面上的黏附，同时也有利于细菌的代谢产物在牙面的聚集，促进牙菌斑的成熟；3）粘附，变链菌能通过疏水键、钙桥、附着素等作用可逆性的吸附于牙面，或通过细菌表面的黏附素与唾液受体发生特异性作用定植于牙面，为其在牙面上致龋创造条件。因此，在龋病的发生、发展中，致龋菌的产酸、合成胞外多糖以及对牙面的粘附是主要毒力因子[9]。这些致龋环节通过菌细胞的多个相关毒力因子的介导得以完成，如与粘附定植有关的表面蛋白Pl（PAc）和葡萄糖基转移（glucosyltransferases,GTFs）、与产酸有关的乳酸脱氢酶（Lactatedehydrogenases，LDH）、耐酸有关的质子移位膜ATP酶（membrane-boundprotontranslocating，ATPas