马铃薯晚疫病菌线粒体单倍型研究及其对杀菌剂敏感性测定-study on mitochondrial haplotype of phytophthora infestans and its sensitivity to fungicides.docxVIP
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马铃薯晚疫病菌线粒体单倍型研究及其对杀菌剂敏感性测定-study on mitochondrial haplotype of phytophthora infestans and its sensitivity to fungicides
独创性声明
本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究 成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经 发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得 河北农业大学 或其他教育机构的学 位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文
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学位论文版权使用授权书
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马铃薯晚疫病菌线粒体单倍型分析及其对杀菌剂的敏感性测定
马铃薯晚疫病菌线粒体单倍型分析及其对杀菌剂的敏感性测定
河北农业大学硕士学位(毕业)论文
河北农业大学硕士学位(毕业)论文
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1 引 言
马铃薯属于茄科多年生草本块茎植物,原产于南美洲,现已在世界上 100 多个国家和地区栽 培。目前世界上马铃薯的种植面积和产量仅次于小麦、水稻和玉米,在粮食作物中位居第四位。 我国已成为国际上马铃薯生产第一大国,据联合国粮农组织(FAO)报道 2007 年中国马铃薯栽培面
积为 500 万公顷,总产量达 7204 万吨,均居世界首位[1] 。
由致病疫霉[Phytophthora infestans (Mont.) de Bary] 引起的马铃薯晚疫病是马铃薯上最具毁 灭性的病害,在病害大爆发年份,常常造成马铃薯的绝产,该病是制约马铃薯生产的主要因素之 一 [2-4] 。随着对晚疫病研究的逐步深入,目前对于马铃薯晚疫病菌的研究已经进入分子水平,而 各种分子标记技术的应用则对它的分类、演化、致病能力和抗药性等方面的研究提供了更佳精准 和有效的方法。
1.1 分子标记在群体遗传多样性研究中的应用
分子标记,又称 DNA 标记(DNA molecular makers),是指 DNA 水平上的遗传标记。作为基 因型的易于识别的表现形式,遗传标记在植物病原菌的鉴定和遗传多样性的研究方面有着十分重 要的地位。分子标记技术的研究始于 1980 年,目前 DNA 标记技术已有数十种,如 RFLP、RAPD、 SSR、AFLP 和 mtDNA 单倍型等等。广泛应用于遗传多样性研究、遗传育种、系统发育、基因组 作图、基因定位、植物亲缘关系鉴别、基因库构建、基因克隆等方面。随着分子标记技术应用于 植物病理学研究,也随之更多的应用到马铃薯晚疫病研究领域。特别是对于遗传多样性的研究, 种内的多样性是物种以上各水平多样性的最重要来源。遗传变异、生活史特点、种群动态及其遗 传结构等影响着一个物种与其它物种及其环境相互作用的方式。而且,种内的多样性是一个物种 对各种干扰进行成功反应的决定因素。种内的遗传变异程度也决定其进化的趋势。研究马铃薯晚 疫病的遗传多样性,可以更好地了解病菌的各种变化情况。
RFLP 标记
RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphisms),限制性片断长度多态性,是迄今发现最 早、应用最为广泛的 DNA 分子标记之一。RFLP 标记是根据不同品种(个体)基因组的限制性内切 酶的酶切位点碱基发生突变,或酶切位点之间发生了碱基的插入、缺失,导致酶切片段大小发生 了变化,从而可比较不同品种(个体)的 DNA 水平的差异(即多态性),确立生物的进化和分类关系。 该技术己被广泛用于基因组遗传图谱构建、基因定位以及生物进化和分类的研究。但该技术检测 步骤较多,周期长,花费高,所需 DNA 量较多,探针多需用同位素进行标记,这些因素限制了 该技术的推广使用。
1980 年,Botsein[5] 提出了利用 RFLP 作为标记构建遗传图谱的设想。1990 年 RFLP 技术开 始应用于致病疫霉生理小种、交配型及对甲霜灵具有抗性菌株的遗传背景研究。1992 年,Goodwin 等[6] 利用 RG-57 探针分析了墨西哥中北部的晚疫病菌的遗传结构,发现墨西哥中部病菌的遗传
结构差异显著,这也充分说明这个地区由于 A2 交配型的存在,有性重组率高于其它地区。1998 年,Lionel 等[7] 利用 RG-57 探针和同工酶基因型研究番茄和马铃薯上的晚疫病菌,发现病菌基因 型明显不同,说明致病疫霉
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