弥漫性轴索损伤后易损区胶质疤痕形成的实验分析-experimental analysis of glial scar formation in vulnerable areas after diffuse axonal injury.docxVIP

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2018-07-27 发布于上海
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弥漫性轴索损伤后易损区胶质疤痕形成的实验分析-experimental analysis of glial scar formation in vulnerable areas after diffuse axonal injury

英文缩略词一览表英文缩写英文名称中文名称TBITraumaticbraininjury创伤性脑损伤DAITAIDiffuseaxonalinjuryTraumaticaxonalinjury弥漫性轴索损伤创伤性轴索损伤HEHematoxylineosin苏木精-伊红IHCImmunohistochemistry免疫组织化学β-APPGFAPBeta-amyloidprecursorproteinGlialfibrillaryacidicproteinβ-淀粉样蛋白前体蛋白胶质纤维酸性蛋白EMElectronmicroscopy电子显微镜PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲溶液ROIRegionofinterest感兴趣区IPPImage-ProPlusIPP图像软件处理弥漫性轴索损伤后易损区胶质疤痕形成的实验研究摘要研究目的拟通过免疫组化、透视电镜观察等方法研究大鼠DAI后易损区神经胶质疤痕形成的时间和空间分布规律。研究方法1.使用自主研制的可同时产生瞬间角加速和线加速运动的实验装置（专利号：ZL200920067463.4）建立DAI大鼠模型，使用HE染色、免疫组化染色易损区病理变化过程。.免疫组化应用β-APP标记DAI后ROI神经丝损伤的情况。.免疫组化应用GFAP标记DAI后反应性星形胶质细胞、Iba-1标记DAI后活化的小胶质细胞，应用Image-ProPlus(IPP)5.0软件定量评估DAI大鼠易损区域胶质疤痕形成的程度。.运用免疫荧光技术标记大鼠DAI后海马、胼胝体、内囊感兴趣区域（regionofinterest,ROI）星形胶质细胞和小胶质细胞活化的情况及神经丝损伤的情况，以探索DAI后胶质疤痕形成的定性评估。研究结果1.HE染色检测到非占位性微出血灶；免疫组化染色发现轴缩球形成、神经微丝缠结形成。2.脑干、胼胝体、内囊、白质等易损区免疫组化染色发现轴缩球形成、神经微丝缠结形成、髓鞘崩解，各易损区IOD值较对照组均显著性增高，有统计学意义；伤后各ROI的星形胶质细胞活化数量第3天明显增加，7天达到最大值，持续到1个月。3.DAI后,易损区活化的小胶质细胞IOD值在各时间点较对照组有统计学意义。伤后第3天活化的小胶质细胞明显增加，第7天达到最高值并开始逐渐降低，持续到伤后1个月。4.DAI后，损伤的神经丝周围聚集着大量的活化星形胶质细胞和小胶质细胞，易损区存在着阻碍神经再生的“微疤痕”。研究结论大鼠DAI致伤后易损区微环境中存在不同程度的微胶质疤痕形成，并具有一定的时空规律。关键词弥漫性轴索损伤，感兴趣区，增殖，活化。ExperimentalstudyonvulnerabilityDistrictglialscarformationafterdiffuseaxonalinjuryABSTRACTObjectiveIntendedbyimmunohistochemistry,perspectiveelectronmicroscopyandothermethodsofvulnerabilityDistrictglialscarformationafterdiffuseaxonalinjuryintherattemporalandspatialdistributiondisciplineMethods1.AratmodelofDAIestablishedbyanexperimentaldeviceindependentlydesigned(PatentNo.:ZL200920067463.4)forinducingsimultaneouslinearandangularaccelerations.Thenratsweresacrificedforhematoxylineosin(HE)staining,immunohistochemicalstainingtoevaluateDAIandappreciatetheultramicroscopicchangeslongitudinally.Brainstem,corpuscallosum,internalcapsule,whitematterandothervulnerableareasbyimmunohistochemicalstainingaxisshrinkingballformation,neurofilamenttanglesformationofmyelindisintegration,theIODvaluesofeachvulnerableareathanthecontrolgroupweresignificantlyhigher,statisticallysignificant;afterinjury,astrocytesin