清热化瘀ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌注损伤mmp-2、mmp-9表达影响-effect of qingre huayu ⅱ recipe on mmp - 2 and mmp - 9 expression in rats with cerebral ischemia-reperfusion injury.docxVIP

PAGE PAGE 2 综 述 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 3 7 致 谢 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 4 5 攻 读 学 位 期 间 发 表 的 学 术 论 文 目 录 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 4 6 作 者 声 明 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 4 7 个 人 简 历 · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · · 4 8 中 文 摘 要 目的 ：通过研究清热化瘀Ⅱ号方对大鼠脑缺血再灌注损伤 MMP-2、MMP -9 表达的影响，探讨其减轻缺血再灌注损伤的作用机制，为临床应用清 热化瘀Ⅱ号方治疗急性缺血性中风提供理论和实验依据。 方法 ： 成年健康Sprague-Dawley(SD)大鼠110只，雌雄各半，随机分为 空白组（5只）、假手术组（5只）、模型组（50只）、治疗组（50只），模 型组、治疗组按缺血2h后再灌注3h、6h、12h、24h、48h分为5个亚组， 每个时间点10只大鼠。采用灌胃法（ig）,每天二次，上午8～9点，下午3～ 4点各1次。连续预处理给药三天，最后一次于术前1h给予，术后继续灌 胃用药，直 至全部 处死动物 。 治疗 组 灌胃清热化 瘀Ⅱ号 方 , 剂量 为 1.6ml/100g；空白组、假手术组和模型组分别灌胃与治疗组等量生理盐水； 参照Longa[1]等线栓法，并加以改进，制作 急性大脑中动脉缺血再灌注损 伤模型。保 持大鼠局灶性脑缺血2h后进行再灌注，分别再灌注3h、6h、 12h、24h、48h进行观察，采用Longa[1]评分标准，合格者进入下一步操作， 注意随时补充因不合格或死亡淘汰的大鼠，确保每组10只。测定各组实 验大鼠脑组织含水量，观察其病理学形态变化及运用免疫组化的方法检 测MMP-2、MMP-9的阳性表达水平。 结果： 1 . 各组脑组织含水量比较：模型组与假手术组比较，在各时间 点脑组织含水量均明显升高(P0.05)；治疗组与模型组比较，在各时间 点脑组织含水量均明显降低(P0.05)，但高于假手术组(P0.05)；空白 组和假手术组相比，脑组织含水量未见明显增加(P＞0.05)。2.运用HE染 色各组大鼠脑组织切片进行组织形态学观察:假手术组和空白组细胞结 构基本正常；模型组大脑皮质层和海马区结构完整性破坏，神经细胞间 隙增宽，神经细胞不清甚至缺失，胞浆变红，核仁破坏、甚至核固缩或 消失。治疗组大鼠皮质及海马区也可见神经元变性，核仁破坏，也有核 固缩或消失现象，但神经元变性的数量明显少于模型组。3.免疫组化法 处理脑组织切片观察MMP-2、MMP-9的阳性细胞数:(1)假手术组可见少 量MMP-2、MMP-9阳性细胞数表达，模型组和治疗组在各时间点均可见 明显增多的MMP-9和MMP-2的阳性细胞表达；(2)MMP-9阳性表达细胞 数在缺血再灌注3h、6h有少量表达，再灌注12h开始显著增