青葙子化学成分及生物活性分析-chemical constituents and biological activity analysis of celosia argentea.docxVIP

摘要青葙子来源于苋科青葙属植物青葙（CelosiaargenteaL.）的干燥成熟种子，始载于《神农本草经》，是药典收载品种。其味苦、性微寒，归肝经。具有清肝，明目，退翳之功效。用于肝热目赤，眼生翳膜，视物昏花，肝火眩晕。在课题组前期从青葙子中得到了4个五环三萜皂苷化合物青葙苷A、青葙苷B、青葙苷C和青葙苷D的基础上，作为延续性工作，继续对青葙子的化学成分进行研究，首次运用HSCCC-ELSD方法，通过摸索逆流色谱溶剂系统的分配系数和溶剂选择软件，对HSCCC的应用积累了一定经验，最终获得10个化合物。应用理化常数测定和光谱学方法（mp、IR、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC、COSY、NOESY、EI-MS、HR-ESI-MS）鉴定了其中8个化合物的化学结构，其中5个化合物为新化合物，分别命名为青葙苷C1（CelosinC1）、青葙苷D1（CelosinD1）、青葙苷E（CelosinE）、青葙苷F（CelosinF）和青葙苷G（CelosinG）；1个为首次分得，为鸡冠花苷（Cristatain）。对青葙苷A、青葙苷B、青葙苷C1、青葙苷D1、青葙苷E、青葙苷F、青葙苷G和鸡冠花苷8个化合物的体外抗肿瘤活性进行研究的结果表明，青葙苷A、青葙苷B和鸡冠花苷对五种肿瘤细胞SHG44（人胶质瘤细胞）、HCT116（人肠癌细胞）、CEM（人白血病细胞）、MDA-MB-435（人乳腺癌细胞）和HepG2（人肝癌细胞）的IC50值:SHG44(35.37±1.36×10-6mol/L,21.65±1.16×10-6mol/L,35.82±2.96×10-6mol/L),HCT116(38.69±1.86×10-6mol/L,36.31±3.69×10-6mol/L,40.36±4.11×10-6mol/L),CEM(39.82±2.74×10-6mol/L,24.43±1.46×10-6mol/L,47.76±2.66×10-6mol/L),MDA-MB-435(38.72±3.24×10-6mol/L,12.68±1.08×10-6mol/L,41.74±2.93×10-6mol/L),HepG2(39.53±2.94×10-6mol/L,31.86±3.55×10-6mol/L,42.82±2.32×10-6mol/L)，表明3个化合物均有较好的抗肿瘤活性，而青葙苷C1、青葙苷D1、青葙苷E、青葙苷F、青葙苷G对5种肿瘤细胞无明显抗肿瘤活性。以四氯化碳诱导的小鼠肝损伤模型，对青葙苷C1和青葙苷D1的体内保肝活性进行了研究。结果表明青葙苷C1和青葙苷D1连续口服给药7天，对CCl4引起的AST、ALT升高有明显的预防作用，均显著的提高了四氯化碳肝损伤引起肝组织SOD、CAT、GSH的活力水平和降低了脂质过氧化产物MDA的含量，在2.0mg·kg-1-8.0mg·kg-1范围内与对照组有非常显著差异（P0.01）。病理切片显示，模型组小鼠肝组织呈局灶性坏死，坏死灶内肝细胞结构已遭到严重破坏，肝细胞轮廓基本消失，并伴有大量以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润，中高剂量组动物的肝小叶结构清晰，肝细胞排列紊乱，肝内偶见水样变性细胞，基本无炎症细胞浸润。青葙苷C1和青葙苷D1口服对CCl4引起的生化改变有明显的预防作用。本研究结果为青葙子的合理开发与利用奠定基础。关键词：青葙子，肝损伤，抗肿瘤活性，化学成分AbstractCelosiaargenteaL.(Family-Amaranthaceae)isfirstlyrecordedinShenNong’sHerbal.Infolklorepractice,theseedsofCelosiaargenteaL.hasbeenusedtraditionallyforremovingliver-heat,improvingeyesight,clearingwind-heat,loweringthebloodpressureandanti-inflammation,accordingtoChinesePharmacopoeia(editionof2010).InordertostudythechemicalconstituentsofCelosiaargenteaL.seedsandprovideevidenceforestablishingthequalitystandardsofCelosiaargenteaL.,weisolatedandpurifiedthechemicalconstituentsof30%and60%fractionsofCelosiaargenteaL.seedsbyHSCCC-ELSD.Thestructureswereidentifiedonthebasiso