山茱萸多糖对衰老wistar大鼠海马klotho-akt及其下游分子表达影响的研究-effects of cornus officinalis polysaccharides on klotho - akt and its downstream molecules expression in hippocampus of aging wistar rats.docxVIP

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2018-07-31 发布于上海
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山茱萸多糖对衰老wistar大鼠海马klotho-akt及其下游分子表达影响的研究-effects of cornus officinalis polysaccharides on klotho - akt and its downstream molecules expression in hippocampus of aging wistar rats.docx

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山茱萸多糖对衰老wistar大鼠海马klotho-akt及其下游分子表达影响的研究-effects of cornus officinalis polysaccharides on klotho - akt and its downstream molecules expression in hippocampus of aging wistar rats

学术诚信承诺本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得佳木斯大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。签名：日期：关于论文使用授权的说明本人完全了解佳木斯大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。（保密的论文在解密后应遵循此规定）签名：导师签名：日期：目录一、摘要1二、Abstract3三、前言5四、文献综述6五、材料与方法22六、结果29七、讨论43八、结论46九、参考文献47十、致谢55十一、英文缩写56十二、攻读学位期间发表的学术成果57十三、附图58摘要目的：通过观察山茱萸多糖对衰老Wistar大鼠学习记忆能力的影响，探讨山茱萸多糖改善大鼠学习记忆能力的分子机制与海马Klotho及其下游分子Akt、Foxo3a、Mn-SOD表达的关系，说明山茱萸多糖对衰老Wistar大鼠脑退行性改变的影响。方法：采用青年Wistar大鼠10只、自然衰老Wistar大鼠42只，用Morris水迷宫法检测衰老Wistar大鼠学习记忆能力，学习记忆能力相对青年组降低15%-30%者随机分为衰老组、水煎剂组和多糖组。衰老组以2ml/kg/d生理盐水灌胃，连续42d；水煎剂组和多糖组按3.14g生药/kg/d灌胃（多糖组0.175g多糖/kg/d），连续42d；各组于最后一次给药后检测学习记忆能力。采用RT-PCR法检测Klotho、Akt、Foxo3a、Mn-SOD基因的mRNA表达水平；采用免疫组化法检测Klotho和Mn-SOD蛋白的表达。结果：与青年组比较，衰老组、多糖组和水煎剂组学习记忆能力显著降低（p＜0.01，p＜0.01，p＜0.01）；Klotho、Foxo3a和Mn-SODmRNA表达水平明显减少（p＜0.01，p＜0.01，p＜0.01；p＜0.01，p＜0.05，p＜0.05；p＜0.01，p＜0.01，p＜0.01），Klotho和Mn-SOD蛋白表达也降低（p＜0.01，p＜0.01，p＜0.01；p＜0.01，p＜0.05，p＜0.01），而AktmRNA表达则显著增高（p＜0.01，p＜0.05，p＜0.01）。与衰老组相比，多糖组和水煎剂组大鼠的学习记忆能力明显改善（p＜0.01，p＜0.01），Klotho和Mn-SODmRNA及蛋白表达均显著升高（p＜0.01，p＜0.01；p＜0.01，p＜0.01），Foxo3amRNA表达明显升高（p＜0.01，p＜0.01）；而AktmRNA表达明显降低（p＜0.01，p＜0.05）。相关性分析结果表明，KlothomRNA和蛋白表达都与空间探索能力呈显著正相关性（R=0.68339，p＜0.0001；R=0.72356，p＜0.0001）；KlothomRNA和蛋白表达与Mn-SODmRNA和蛋白表达也分别呈正相关（R=0.81486，p＜0.0001；R=0.75774，p＜0.001）；但KlothomRNA表达与AktmRNA表达呈显著负相关性（R=-0.71586，P＜0.0001)；KlothomRNA表达与Foxo3amRNA表达呈正相关（R=0.74885，P＜0.0001）。结论：Klotho与衰老Wistar大鼠学习记忆能力及Klotho与其它分子之间均表现出相关性；山茱萸多糖和水煎剂可通过上调Klotho和Mn-SOD表达，下调Akt、上调-1-Foxo3a基因的mRNA表达，提高衰老Wistar大鼠的学习记忆能力；山茱萸多糖和水煎剂对大鼠学习记忆能力的改善无显著差别，但上调Klotho和Mn-SODmRNA表达的作用多糖好于水煎剂，多糖是山茱萸发挥延缓衰老作用的重要成份。关键词：山茱萸多糖；学习记忆能力；Klotho；Akt；Foxo3a；Mn-SOD-2-ThestudyoftheeffectonKlotho-AktanditsdownstreammolecularoftheagingWistarratshippocampusbyPolysaccharidesAbstractObjective:ToobservetheeffectonthelearningandmemoryabilityofagingWistarratsbyPolysaccharides,wediscussedtherelationshipbetweenthemolecularmechanismsofimprovinglearning