细菌的检查与防治原则ppt课件.ppt

凝集反应类型： 1、玻片法凝集试验 2、胶乳凝集法 用胶乳颗粒包被已知的抗血清，与标本中存在的细菌抗原结合产生凝集，以鉴定细菌 协同凝集试验 ——用于检测传染病早期血液及分泌液中的微量Ag。 反向间接凝集试验 ——某些传染病和原发性肝癌的早期诊断。 细菌的生理生化特征检测 碳水化合物的代谢试验 甲基红试验 【原理】 细菌在代谢过程中分解葡萄糖产生丙酮酸，某些细菌可进一步将丙酮酸分解为乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值下降至pH4.5以下，使甲基红指示剂变红。（阳性）有些细菌分解葡萄糖产酸量少，或进一步将酸转化为其他物质如醇、酮、醛、气体和水，则培养基的PH在6.2以上，加入甲基红指示剂呈黄色（阴性）。 主要用于大肠埃希菌和产气肠杆菌的鉴别。 甲基红试验 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 pH值6.2 pH4.4 （—） （+） （指示剂红色） （指示剂黄色） M - 甲基红（methyl red）实验 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 甲基红 - 葡萄糖→丙酮酸 甲基红 + - + 细菌的生理生化特征检测 碳水化合物的代谢试验 五、V-P试验 【原理】 某些细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基中能分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步脱羧成乙酰甲基甲醇，后者在强碱环境下，被空气中的氧氧化为二乙酰，二乙酰与培养基中的精氨酸所含的胍基发生反应，生成红色化合物，称V－P（+）反应。 与甲基红试验一起使用，甲基红试验阳性，则V-P试验阴性。反之也如此。 VP试验 葡萄糖 丙酮酸 乙酰甲基甲醇 二乙酰 红色 OH- + 含胍基 化合物 （—） （+） VP试验 葡萄糖→丙酮酸→乙酰甲基甲醇 →二乙酰→红色化合物 + 胍基化合物 葡萄糖→丙酮酸 × × 乙酰甲基甲醇 - - + 细菌的生理生化特征检测 蛋白质和氨基酸的代谢试验：不同细菌分解蛋白质能力不同，可用于鉴别细菌。 一、苯丙氨酸脱氨酶试验 【原理】 细菌具有苯丙氨酸脱氨酶，能将培养基中的苯丙氨酸脱氨变成苯丙酮酸，加入三氯化铁试剂与苯丙酮酸螯合后变为绿色 。 主要用于鉴定变形杆菌属、摩根菌属、普罗威登菌属细菌，均为强阳性，肠杆菌科其他细菌均为阴性。 细菌的生理生化特征检测 蛋白质和氨基酸的代谢试验 二、氨基酸脱羧酶试验 【原理】 氨基酸脱羧酶试验原理：具有氨基酸脱羧酶的细菌，能分解氨基酸使其脱羧生成胺（赖氨酸→尸胺，鸟氨酸→腐胺，精氨酸→精胺）和二氧化碳，使培养基变碱。使指示剂显示出来。最常测定的氨基酸有三种：赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸。 结果：对照管应呈黄色，测定管呈紫色（指示剂为溴甲酚紫）为阳性，若测定管呈黄色为阴性。若对照管呈现紫色则试验无意义，不能作出判断。（对照管只有葡萄糖没有氨基酸）。 应用：主要用于肠杆菌科细菌的鉴定。如沙门菌属中除伤寒和鸡沙门菌外，其余沙门菌的赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶均为阳性。志贺菌属除宋内和鲍氏志贺菌外，其他志贺菌均为阴性。 阴性 阳性 细菌的生理生化特征检测 蛋白质和氨基酸的代谢试验 三、精氨酸双水解酶试验【原理】 原理：精氨酸经两次水解，先生成瓜氨酸和氨，瓜氨酸又在瓜氨酸酶的作用下，形成鸟氨酸、氨及二氧化碳。鸟氨酸又在鸟氨酸酶的作用下生成腐氨和二氧化碳，酸碱指示剂转为碱性指示为阳性。 精氨酸可通过双水解和脱羧酶两个途径进行分解，两个途径可单独进行或同时进行。如培养基的PH指示剂急剧变碱，可能是双水解途径，如PH变化弱而慢，且不形成氨，可能是以脱羧酶途径分解的，但仅从培养基PH变化来确定何种途径并不可靠，如欲鉴别应作气相色谱分析。 细菌的生理生化特征检测 蛋白质和氨基酸的代谢试验 四、尿素酶试验原理：具有尿素酶的细菌能分解尿素产生氨，使培养基呈碱性，酚红指示剂变为红色。 变形杆菌、摩根、雷氏普罗维登、克雷伯为阳性 （—） （+） 尿素 氨 培养基变碱性 红色 细菌的生理生化特征检测 蛋白质和氨基酸的代谢试验 五、吲哚试验原理：有些细菌具有色氨酸酶，能分解蛋白胨中的色氨酸产生吲哚。吲哚本身无色，不能直接观察结果，但可与吲哚试剂中的对位二甲氨基苯甲醛形成红色的玫瑰吲哚，而呈现红色被肉眼识别。 肠杆菌科细菌的鉴定；大肠杆菌、产酸克雷伯为阳性 吲哚试验 （—） （+） 色氨酸 吲哚（靛基质） 玫瑰吲哚（红色） + 二甲基氨 基苯甲醛 吲哚（indol）试验 色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚