抗真菌药物敏感试验ppt课件.pptVIP

琼脂稀释法 培养基制备 RPMI 1640培养基: 2倍量:RPMI 1640 20.8g,葡萄糖40g, 以0.33M MOPS缓冲液溶解,调整pH值至6.9~7.1,过滤除菌,置-20℃保存。 HR培养基： 2倍量：29.3g HR培养基，NaHCO3 2.0g，溶于1000mL双蒸水中，调整pH值至7.5，过滤除菌，低温保存。 4％琼脂： 40g 琼脂，溶于1000mL蒸馏水中，高压灭菌15min，备用。 琼脂稀释法 菌液的制备 受试菌在SDA中35℃ 培养24小时（念珠菌属）或48小时（新生隐球菌） 取直径约5mm菌落，混悬于5mL灭菌的生理盐水中，涡旋混匀15秒，采用分光光度计在530nm处，调整菌悬液至0.5个麦氏单位浊度，相当于1×106～5×106/mL，作为菌液的工作液。 琼脂稀释法 药物平板的制备 将RPMI 1640培养基或HR培养基置60℃预温。 取4％琼脂，加热融化后，置60℃，保温。 将培养基和琼脂1:1混匀，分装入试管中，每管分装13.5mL，仍置60℃保温。 将不同浓度药液（工作液）1.5mL加入试管中，轻轻震摇混匀，倒入平皿，置水平桌面使之凝固，注意混匀时避免出现气泡。37℃， 15分钟，使干燥。 如采用平板多点接种，可将培养基1