上皮 间充质转化相关标记物在乔本甲状腺炎中的表达及意义-expression and significance of epithelial mesenchymal transition related markers in qiao ben thyroiditis.docxVIP

中文摘要背景和目的乔本甲状腺炎是由日本学者乔本策先生于1912年首先报道并描述的。主要的病理特征是淋巴细胞浸润、淋巴滤泡形成和甲状腺上皮破坏、嗜酸性变及间质纤维化，最终导致不可逆转的甲状腺功能减退。有关乔本甲状腺炎的免疫损伤机制国内外的研究报道很多，但其发生间质纤维化的机制则研究的很少，近些年研究表明，上皮—间充质转化在组织纤维化的发生发展过程中扮演了关键的角色，那么在乔本甲状腺炎病变发展过程中是否存在上皮-间充质转化？如果存在，它在甲状腺间质发生纤维化的过程中又起到了什么重要的作用？那么又有哪些重要的因子调节？目前，在此方面研究报道的还很少，本研究收集101例人乔本甲状腺炎病变标本，利用免疫组化技术和胶原纤维染色技术，观察甲状腺病变中上皮标记物E-cadherin，间充质标记物Vimentin、FSP1和上皮-间充质转化重要的调节因子TGF-β1的表达情况，结合间质中胶原纤维的染色情况，试图寻找人乔本甲状腺炎病变中存在上皮-间充质转化的证据，探索其在间质纤维化方面的重要作用。材料和方法材料本实验收集汕头大学医学院1998-2011年手术存档的甲状腺手术石蜡标本的101例，另取甲状腺肿瘤手术切下来瘤旁正常甲状腺组织30例做对照，经临床病理诊断这101例均为乔本甲状腺炎，其中75例为单纯乔本甲状腺炎，12例合并甲状腺腺瘤，13例合并甲状腺乳头状癌和1例合并甲亢。在这101例乔本甲状腺炎中，男性3例，女性98例，平均年龄45.9岁。对照组全为已婚女性。方法1．HE染色切片观察乔本甲状腺炎的病变特点，确定病理分型。2.胶原纤维染色用Masson染色观察乔本甲状腺炎病变中胶原纤维的面积百分比。3.免疫组织化学染色用Envision两步法观察乔本甲状腺炎组织中E-cadherin、TGF-β1、FSP1、Vimentin蛋白的表达情况。4.图像分析法应用LeicaIM50图像采集系统和Image-ProPlus6.0图像分析系统对染色结果分析。5.统计分析应用SPSS13.0对统计结果进行分析，采用卡方检验、方差分析、Spearman等级相关分析。结果1.HE和Masson染色观察，在101乔本甲状腺炎病变中，淋巴细胞型（L型）69例，嗜酸性上皮型（O型）22例，明显上皮破坏型（P型）10例。随着炎细胞浸润程度的升高，间质胶原面积的百分比也是逐渐增高的，L型(9.16±3.17%）、O型（20.29±6.08%）、P型（50.12±3.68%），各组间两两比较差异均具有显著性（P0.01）。P型炎症病变中纤维化的百分比达到50%。30例正常甲状腺组织中间质胶原成分很少，面积百分比仅为2.19±1.74%，与炎症病变组比较差异有显著的统计学意义（P0.01）。2．上皮细胞标记蛋白E-cad在正常甲状腺组织90.0%（27/30），乔本甲状腺炎和其阳性表达率分别为为60.4%（61/101），两组比较差异有高度显著性（P0.01）。乔本甲状腺炎滤泡上皮E-cad表达逐渐减少，随着炎症和纤维化程度的增加，E-cad的阳性表达率逐渐下降。L型，为63.8%（44/69），O型，为54.5%（10/22），P型，为50.0%（5/10）。E-cad的表达与各病理分型差异没有统计学意义（P0.05）。3.间充质细胞标记蛋白Vimentin在乔本甲状腺炎滤泡上皮中从无到有，随着炎症和纤维化程度的增加，Vimentin的MOD值逐步增加，L型，为0.1078±0.0700；O型，为0.1379±0.0371；P型，为0.1468±0.0155；各组间两两比较发现，L型与O型和P型比较差异均有统计学意义（P0.05），O型与P型比较差异没有统计学意义（P0.05），30例正常甲状腺滤泡上皮未见Vimentin阳性。4.上皮-间充质转化的重要调节因子TGF-β1蛋白在乔本甲状腺炎滤泡上皮中表达逐渐增加。在101例炎症病变组各型中，TGF-β1的表达与乔本甲状腺炎的分型差异有显著的统计学意义（P0.01）。随着炎症和纤维化程度的增加，TGF-β1的MOD值逐步增加，L型，为0.1188±0.0675；O型，为0.1575±0.0177；P型，为0.1681±0.0225；各组间两两比较发现，L型与O型和P型比较差异均有显著性（P0.01），O型与P型比较差异没有统计学意义（P0.05），30例正常甲状腺组织未见TGF-β1的表达。5.上皮-间充质转化特异性蛋白FSP1主要在乔本甲状腺炎的成纤维细胞和淋巴细胞中有表达，在甲状腺滤泡上皮中几乎无表达，极个别滤泡上皮FSP1表达阳性。在101例炎症病变组各型中，FSP1的表达与乔本甲状腺炎的分型差异有显著统计学意义（P0.01），随着炎症和纤维化程度的增加，FSP1的MOD值逐步增加，L型，为0.0784±0.06