双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株ho-8910凋亡作用的实验分析-experimental analysis of dihydroartemisinin on apoptosis of human ovarian cancer cell line ho - 8910.docxVIP

双氢青蒿素对人卵巢癌细胞株HO-8910凋亡作用的实验研究摘要目的:探讨双氢青蒿素（DHA）对人卵巢癌细胞株H0-8910裸鼠皮下移植瘤的生长及Bcl-2表达的影响，并对其机制作初步探讨。方法:将人卵巢癌细胞株H0-8910注入裸鼠的腋下，建立人卵巢癌移植瘤的动物模型,并随机将建模成功的30只裸鼠分为5组，即DHA低剂量组(100mg/kg)、DHA中剂量组(150mg/kg)、DHA高剂量组(200mg/kg)，阳性对照组(顺铂2mg/kg)、空白组(生理盐水)，6只/组。顺铂采取腹腔注射的方式给药，5d后停药，其余各组均采用灌胃给药法持续给药10d，第11d处死裸鼠，称取瘤质量,比较干预后各组移植瘤抑瘤率；应用RT-PCR法测定移植瘤中Bcl-2mRNA的表达；免疫组化法和western-blot法检测肿瘤细胞内Bcl-2蛋白的表达。结果:①病理学观察见细胞的体积较大，胞质疏松，核深染，可有不同程度的核固缩、核碎裂及核溶解，细胞中可见局灶性坏死。②DHA对裸鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用，并具有浓度依赖性，DHA低、中、高剂量组及顺铂组的抑瘤率分别为25.4%、36.9％、44.3%及55.7%,与生理盐水组比较差异均有统计学意义P0.05,DHA各实验组抑瘤率与顺铂组相比,差异有统计学意义P0.05。③RT-PCR法检测到双氢青蒿素组Bcl-2基因表达下调。④免疫组化及western-blot法结果证实双氢青蒿素组Bcl-2蛋白表达明显低于空白组P0.05，且随着DHA剂量的增加Bcl-2蛋白表达减弱。结论:双氢青蒿素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的生长有明显的抑制作用,且与剂量有一定的关系，其机制可能与下调Bcl-2的表达诱导细胞凋亡有关。关键词：双氢青蒿素；Bcl-2；卵巢癌；裸鼠；InhibitoryeffectsofdihodryartemisininonovariancancerHO-8910cellObjectiveToexploretheeffectofdihodryartemisinin（DHA）onthegrowthofhumanovariancancerHO-8910cellsandtheactivityofBcl-2,andstudythemechanism.MethodsNudemousemodeloftransplantedovariancancerwasestablishedbyinjectingHO-8910cellsintoaxillaryfossa,andthenthemicewererandomlydividedintolow-dose-groupofDHA，middle-dose-groupofDHA，high-dose-groupofDHA，positivecontrolDDPgroup,blankcontrolgroup，eachofwhichwascomposedofsixnudemice.ThoseinDDPcontrolgroupintraperitonealinjectedwithDDPatadosageof2mg／kgbodyweightandreceivedfor5days.ThemiceinDHA-low-dose、DHA-middledoseandDHA-high-dosegroupsweregavagewithDHAatdosagesof100、150and200mg／kgbodyweighteveryotherdayrespectively，andwhilethoseinblankcontrolgroupgavagewithsaline，andcontinuouslyreceivedfor10daysinnudemice.Killthemiceonday11aftertreatmenttoobservethetumorgrowthandcomparisonoftumorinhibitoryrateaftertheintervention.DeterminationofBcl-2expressionintransplantedtumorbyRT-PCR，andtheexpressionofBcl-2wasdeterminedbyimmuno-histo-chemicalassayandwestern-blot.Results①Pathologicalobservationshowscellsbecomelarge,andloosecytoplasm,nucleusdeeplystained,pyknosis,nucleardissolution,nuclearfragmentation,chromatinlumpsalsocanbefound，andcellshave