芍药苷对小鼠日本血吸虫病肝纤维化il 13信号转导通路的影响-effect of paeoniflorin on il 13 signal transduction pathway in mice with schistosoma japonicum liver fibrosis.docxVIP

下载本文档

1
0
约8.82万字
约 88页
2018-07-31 发布于上海
举报
版权申诉

芍药苷对小鼠日本血吸虫病肝纤维化il 13信号转导通路的影响-effect of paeoniflorin on il 13 signal transduction pathway in mice with schistosoma japonicum liver fibrosis.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

芍药苷对小鼠日本血吸虫病肝纤维化il 13信号转导通路的影响-effect of paeoniflorin on il 13 signal transduction pathway in mice with schistosoma japonicum liver fibrosis

尾蚴后第12d(在杀虫治疗前第30d)开始给予PAE(30mg/kg/day)连续灌胃30天，在第102天处死小鼠后，分别检测：1)PAE对小鼠肝脏组织学的影响：肝组织的HE和Masson染色结果显示，PAE能显著降低小鼠血吸虫并肝肉芽肿大小和肝纤维化程度，且和模型组相比较，肝肉芽肿大小减小达53.4%,肝纤维化评分降低达38.5%。2)免疫组织化学结果提示：PAE治疗组小鼠肝脏α-SMA、ColI表达较模型组分别降低了30.3%和46.6%；3)肝组织匀浆羟脯氨酸碱消化比色法检测显示：PAE明显降低治疗组小鼠肝组织的羟脯氨酸含量，并较模型组小鼠Hyp含量降低达54.7%；4)肝组织匀浆ELISA检测显示：PAE治疗组小鼠肝组织的ColI和ColШ在肝组织中的表达明显降低。以上结果提示早期给予PAE能改善慢性血吸虫性肝肉芽肿和肝纤维化的形成。2.PAE对小鼠肝脏IL-13和IL-13Rα2的浓度的影响肝组织匀浆ELISA检测显示PAE治疗组小鼠肝组织的IL-13和IL-13Rα2含量与模型组小鼠相比较，前者明显降低，而后者却显著升高，提示IL-13表达的降低以及IL-13Rα2的表达增强可能与日本血吸虫性肝肉芽肿和肝纤维化的改善有关。3.rIL-13刺激HSC受体成分的分析RT-PCR显示，rIL-13刺激HSCs后，引起其异二聚体受体IL-13Rα1/IL-4Rα的转录而并不引起另一诱饵受体IL-13Rα2的转录，同时不同浓度PAE对IL-13Rα1/IL-4Rα的转录均无任何影响，这提示rIL-13刺激HSC所致的胶原蛋白表达可能是通过IL-13Rα1/IL-4Rα信号转导通路发挥作用。4.PAE对rIL-13刺激HSC增值的影响MTT法显示，50ng/ml的rIL-13可诱导HSCs的增殖，而PAE(15、30、60、120mg/L)能浓度依赖性地抑制HSCs增殖。这一结果提示，PAE抑制rIL-13所致的HSCs增值可能是其Col?蛋白分泌和合成减少的机制之一。5.PAE抑制rIL-13刺激HSCs胶原蛋白的分泌及合成ELISA、RT-PCR和Westernblotting法显示，rIL-13可诱导HSC合成及分泌胶原蛋白?，PAE不仅浓度依赖性地抑制HSCsCol?的分泌，且浓度依赖性地抑制IL-13刺激HSC的ColI转录、合成。6.PAE明显抑制rIL-13刺激的STAT6磷酸化的形成Westernblotting显示,rIL-13刺激HSCs后，STAT6的活化在2小时达到最强，4小时后明显减弱；而PAE浓度依赖性的抑制STAT6的活化，同时JAK的抑制剂AG490亦能抑制STAT6的活化。这一结果提示，PAE抑制胶原蛋白的合成可能是抑制STAT6的活化所致，而PAE除了可能直接抑制STAT6活化外，另外可能是通过抑制其上游JAK的活化而导致下游的STAT6活化减少；STAT6活化的抑制导致其下游目的蛋白-胶原蛋白?的合成和分泌减少。7.PAE增强HSCs中SOCS-1的表达RT-PCR和Westernblotting显示，rIL-13能诱导HSCs转录和合成SOCS-1，且在rIL-13刺激后1小时SOCS-1的表达达到峰值，随着时间的延长，SOCS-1的表达量下降；而PAE浓度依赖性的增强SOCS-1的表达。这一结果提示，PAE的增强JAK和STAT6负性调控子SOCS-1表达可能是HSCs胶原蛋白?合成和分泌减少的机制之一。结论：1.早期给予PAE可减轻小鼠日本血吸虫病肝肉芽肿、肝纤维化的程度。2.IL-13表达降低、IL-13Rα2的表达增强可能是PAE减轻小鼠日本血吸虫病肝肉芽肿、肝纤维化程度的机制之一。3.PAE抑制rIL-13所刺激的HSC的增殖，可能是PAE抑制rIL-13所致HSCs分泌和合成胶原蛋白?的机制之一。4.rIL-13体外可刺激HSCs表达IL-13Rα1/IL-4R异二聚体受体，而IL-13另一诱骗受体(decoyreceptor)IL-13Rα2并不转录，PAE亦不影响这两种受体的表达，提示IL-13可能是通过IL-13Rα1/IL-4R异二聚体受体促进胶原蛋白的合成。5.rIL-13能刺激STAT6的活化，PAE浓度依赖性抑制STAT6的活化，同时JAK抑制剂AG490也能抑制STAT6的活化，提示PAE的作用机制之一可能通过直接抑制STAT6活化或者同时抑制JAK进而导致STAT6的磷酸化降低。静息状态的HSC并不表达STAT6的负性调控蛋白SOCS-1，rIL-13诱导HSC表达SOCS-1,PAE则增强SOCS-1蛋白的表达，提示PAE增强SOCS-1蛋白的表达是导致STAT6磷酸化降低的因素之一。总之，PAE抑制rIL-13刺激HSC胶原产物是通过抑制HSC增值，下调