食品中人工合成色素的毛细管电泳分离检测研究ppt课件.pptVIP

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食品中人工合成色素的毛细管电泳分离检测研究ppt课件

电渗流的影响 1.电渗的方向与固体表面电荷所具有的电泳方向相反; 2.电渗的强度与定域离子的数量或固液界面成正比; 3.电渗的强度与流路通道孔径有关。 在毛细管等速电泳和毛细管等电聚焦以及毛细管凝胶电泳中,电渗流的存在是有害的,必须加以消除。毛细管等速电泳中,电渗流的存在会干扰等速稳态的建立;而在毛细管等电聚焦中,电渗流的存在则无法保持稳定的pH梯度;毛细管凝胶电泳中的电渗流会使管内凝胶滑出毛细管,破坏其稳定性,降低使用寿命。 但在毛细管区带电泳、胶束电动毛细管色谱、 毛细管电色谱及电动毛细管色谱中,则有效地利用了电渗流的独特性质。 一定要充分的利用好电渗流,该实验中加入了四乙烯五胺就是降低电渗流。 毛细管电泳技术的介绍 电泳电压的影响 理论和实验均表明,效率和电压间存在极大值。极大电压通常也是最佳工作电压。实际分离中,若极大电压超出了仪器的控制范围,可选择仪器允许的最大输出电压。极大电压有可能很小,若此时的分离度很高,也可以选择大于极大值的电压进行分离。极大电压可以利用理论计算或实验测定来获得。 理论效率方法计算过程繁琐且不可靠,故采用实验来确定,即通常通过测定电压和电流的关系曲线来确定工作电压。 毛细管电泳技术的介绍 电泳温度的影响 电泳温度的选择主要指毛细管外表温度的选择与控制。温度变化不仅会影响到分离效果,还会影响到分离的重现性。 多数情况下,在20℃到30℃之间进行电泳,能获得较好的 分离结果。不行的话,需要调整或优化温度。例如采用恒温装置或者开空调控制室温等。 但是温度的控制,目前还受到仪器条件的限制,大多数商品仪器只能在20℃-50℃之间进行选择,而不能实现温度 梯度控制。所以温度的控制还有待进一步发展。 毛细管电泳技术的介绍 分离过程中,毛细管的尺寸、涂层以及其洁净度都起着十分重要的作用。 毛细管尺寸的选择与分离模式和样品有关。不同的样品,选择不同内径的管。其中薄壁毛细管有利于温度的控制。而不同的分离模式,不同的样品,对毛细管内壁性质的要求也不一样。 由于毛细管内分为有涂层和无涂层两种,针对不同的管采用不同的洗涤方式,对于空管,如果洗涤不适当,常 常会使得基线很不平稳,从而影响到样品分离效 果。 毛细管的选择 毛细管电泳技术的介绍 生活家饮食保健孕期选择食用油的学问邢台市第四病院罕见护理应急预案猪气喘病综合防制技术动物营养系列理想蛋白与氨基酸模式的研究进展皮肤病的诊断包括病史体格检查和必要的实验室检查我国有关食物添加剂营养强化剂食物新资本的治理律例与标准 LOGO 食品中人工合成色素的毛细管电泳分离检测研究 姓名 : 蒋奕修 专业 : 分析化学 导师:谢天尧 副教授 Contents 1.毛细管电泳技术的介绍 2.食品中人工合成色素的高效毛细管电泳-电导分离检测 3. 结论 毛细管电泳技术的介绍 毛细管电泳,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离分析技术,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离分析的技术。应用于基因工程研究、单细胞分析、手性分离、小分子离子分离以及元素形态分析。 它以其快速、低耗、简便、高效环境友好、经济、自动、洁净等特点成为继高效液相色谱技术之后的又一项极具吸引力的现代分离分析方法,其具有广阔的应用前景,受到各方面关注。 毛细管电泳技术的发展 19世纪中叶 20世纪80年代初 目前 成为与GC以及HPLC相媲美的一种分离技术, 并被认为是当代分析科学最具活力的前沿研究课题。 Tisdljus首先将电泳方法出色的应用到了生物化学方面,使移动界 面电泳成为研究生物大分子的准确方法,成功分离了人血清并得 到了血清白蛋白和α-,β-,γ-球蛋白,并于1948年获得诺贝尔化学奖。 Jorgenson和 Lukacs奠定了毛细管区带电泳的基础理论后, 电泳技术才开始重新得到发展,出现了一种高效液相分离法 毛细管电泳(亦称高效毛细管电泳)。 毛细管电泳技术的介绍 毛细管电泳分离模式 模式 ? 缓冲液体系 ? 分离机理 毛细管区带电泳(CZE) 自由缓冲溶液 离子淌度 胶束电动毛细管色谱(MECC) 胶束-缓冲溶液 疏水性/离子 性相互作用 毛细管凝胶电泳(CGE) 凝胶-缓冲溶液 分子大小和荷电数目 毛细管等电聚焦(CIEF) 两性电解质 等电点移动界面 毛细管等速电泳(CITP) 前导电解质 尾随电解质 等电点移动界面 毛细管电泳技术的介绍 分离条件的选择 分离条件 选择 电泳电压 电渗

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