闭塞性细支气管炎模型的建立与评价.DOCVIP

基金项目：重庆市卫生和计划生育委员会医学科研计划重点项目 作者简介：李松，硕士研究生，，儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室；E-mail：qw126.com 通信作者：代继宏，博士，主任医师，硕士生导师，重庆医科大学附属儿童医院呼吸中心，研究领域：哮喘、闭塞性细支气管炎发病机制及防治，E-mail：danieljh@163.com 闭塞性细支气管炎小鼠模型的建立与评价 李松1，张素倩1，邹琳2，符州3，代继宏3 儿童发育疾病教育部重点实验室1，重庆市干细胞治疗工程技术研究中心 重庆医科大学儿童医院 临床分子医学中心2，重庆医科大学儿童医院呼吸中心3 [摘要] 目的 探讨建立闭塞性毛细支气管炎（BO）小鼠动物模型的方法。方法 将SPF级C57BL/6雄性小鼠(6-8w)随机分为两组：对照组和模型组（BO组），每组6-8只。模型组构建采用初次气管内滴注2,3丁二酮（DA）（490mg/ml即500mg/kg）1次，对照组采用初次气管内滴注已消毒的蒸馏水代替，其余实验条件和方法均和模型组相同，饲养于SPF级动物中心，至第3天和第7天收集标本,即分别留取BALF和左肺行病理学检测。饲养期间观察小鼠一般状态，监测两组体重变化、用无创肺功能体描仪行小鼠气道高反应监测、支气管肺泡灌洗、细胞计数及炎性细胞分类计数；左肺行病理切片、HE染色、图像分析与采集。结果 模型组小鼠给予DA后1天可出现吼喘、呼吸加快等表现，监测体重显著低于对照组（p＜0.05）。与对照组相比，模型组肺功能（雾化乙酰甲胆碱浓度为50mg/ml时）Penh明显升高（p＜0.05）。模型组小鼠BALF炎性细胞总数及分类计数可见第3天时中性粒细胞总数显著高于对照组（p＜0.05），第7天时淋巴细胞总数、巨噬细胞总数显著高于对照组（p＜0.05）。病理切片HE染色可见典型的BO改变（3天模型组细支气管腔内及管腔周围大量炎性细胞浸润，管腔严重闭塞，组织急性期出血严重；7天模型组基底细胞严重坏死，气道上皮细胞虽附着于基底，但可见细胞明显增生肥大，胞核丢失严重，管腔内炎性细胞浸润，管腔壁增厚，类纤维化表现）。结论 C57BL/6小鼠给予气管内滴注DA（500mg/kg）1次，可于第7天观察到典 型的急性期BO改变，可以成功建立BO小鼠动物模型。 [关键词] 闭塞性细支气管炎；2,3丁二酮；小鼠；模型 Establishment and evaluation of model of bronchiolitis obliterans Li Song1,Zou Lin2,Dai Jihong3（1Key Laboratory of Developmental Diseases in Childhood of Ministry of Education, 2Chongqing Municipal Stem Cell Therapy Engineering Technical Research Center Center for Clinical Molecular Medicine, 3Center of Respiratory Disorders, Children’s Hospital, Chongqing Medical University, Chongqing, 400014, China） [Abstract] Objective To explore the establishment the mouse animal model method for bronchiolitis obliterans (BO). Methods Forty C57BL/6 mice (SPF) were randomly divided into normal control group and BO model group and 20 mice per group. The mice of BO group were intratracheal instillated with Diacetyl (DA) (490mg/ml，500mg/kg) and the mice in control group with sterile distilled water. The rest of the experimental conditions and methods were the same. The mice were kept in SPF class animal center 3 and 7 days to collect specimens. The mice was dyn