协同刺激分子b7-h3在人结直肠癌肿瘤微环境中的作用机制及临床意义-mechanism and clinical significance of b7 - h3 in microenvironment of human colorectal cancer.docx

11 11 中文摘要 协同剌激分子 87-阳在人结直肠癌肿瘤微环墙中的作用机制及临床意义 活性增加，同时提高 IFN吁的分泌和表达，被认为是一正性协间剌激分子。随后的研 究发现， B7-H3倍号可负性调控 T细胞的活化及其介导的免疫应答，因此认为 B7-H3 可能是一负性协同剌激分子。由于 B7-H3的受体目前尚未确认，使得对其功能的研究 难以深入开展。业已表明， B7-H3蛋白在诸多肿瘤组织中高表达，是现在肿瘤细胞表 面及胞浆里，在肿瘤血管也有表达，尤为有意义的是异常表达的 B7-H3分子与肿瘤的 临床病理因素和预后相关，显示其在肿瘤发生和进展中的重要作用。目前，对于 B7-H3 分子在肿瘤组织中异常表达的调节机制，以及日 7-83分子如何参与肿瘤免疫应咎的调 控机制尚待研究。 结直肠癌是人类最常见的癌症之一，在世界范围内发病率及死亡率居恶性肿瘤第 四位。结直肠癌的发生呈现出从正常组织，经过息肉、腺瘤、高级别瘤变等病变缓慢 发展至1富的漫长过程，微环境中免疫细胞的浸润、免疫因子的产生及其与肿瘤细胞的 相互作用，发挥了极其重要的作用。本文在 B7-H3分子在结直肠肿瘤微环境表达的临 床意义的基础上进一步探讨及 B7-H3对肠癌肿瘤微环境中浸润免疫细胞的作用和机 制。 第一部分 协同刺激分子 B7-H3 在人结直肠癌中表达的临床意义 【目的】检测人结直肠癌组织中协同剌激分子 B7-H3 的表达，分析其表达句肠 癌|临床病理因素及患者生存时间的关系，探讨 B7-H3 的表达在肠癌演进过程中的意 义。 【方法1收集肠癌手术切除的组织 219例，统计患者的病理资料及生存时间:分 别收集肠癌演进过程中的各阶段病变组织，包括息肉、腺瘤、高级别瘤变和肠癌组织。 通过免疫组织化学染色方法，分析日 7-H3分子在肠癌组织中的表达，统计学分析其表 达的意义。 【结果 1免疫组化结果显示， 219 例结直肠癌患者中， 99 例患者组织低表达 B弘H3 分子，占 45.2%; 120 例患者组织高表达日7-H3 分子，占 54.8%0 B7-H3 在肠癌组织 的表达水平与患者性别、肿瘤部位、淋巴结转移、远处转移以及是否粘液腺癌无显著 相关性;而与患者的年龄、肿瘤大小、分化程度以及肿瘤的分期密切相关。生存分析 显示 B弘H3 表达水平与肠癌患者生存率的相关性虽无显著统计学意义，但 40 个月后 的生存情况显示了日7-H3 低表达患者的生存率高于 B弘H3 商表达患者的趋势。进而 协同剌激分子 B7-阳在人结直肠硝肿痛微环境中的作用机制及临床意义 中文摘要 研究发现 B7H3 在腺瘤阶段就呈现表达，而后高表达在高级别瘤变及肠癌组织中， B7 家族其他负性分子 B7Hl 、B7-H4 则仅局限在肠癌组织中表达。 【结论}协同刺激分子 B7剖3在肠癌组织中异常高表达，并与肠癌的分期和肿瘤 进展密切相关:日7-H3在结盟肠演变早期阶段即表达，是 B7家族负性分子中最早参与 肠癌事件发生的分子，这些均提示自 ?ωH3分子参与了肠癌演进的整个过程并发挥重要 的作用。 第二部分可溶性日7-H3分子在肠癌患者外周表达的临床意义及产生机制 【目的 1 检测可溶性 B7-H3分子在肠癌患者外周血的表达，分析其临床意义:探 讨B7-H3在肠癌细胞异常表达的调节机制及可溶性 B7-H3分子的产生机制。 【方法】收集肠癌患者术前外周血标本 56例和健康人外周血 60例，统计患者病理 资料。采用自尊联免疫标记法测定可榕性日机 H3分子在正常人及肠癌患者外周的表达， 统计学分析其临床意义。流式细胞术检测肠癌细胞株 B7-H3分子的表达，采用细胞因 子1NF-a、IFN-y体外作用肠癌细胞后，使用流式细胞术、酶联免疫标记及 PT-PCR方 法分析其膜型和可溶性 B7H3及B7-H3mRNA表达的改变，以及 RTPCR分析肠癌细胞 B7-H3分子两种异构体的表达和细胞因子对其调节作用;使用基质金属蛋白酶抑制剂 (MMPI) 抑制可溶性肘，日3的表达。 【结果】ELlSA结果显示，正常人外周血存在 16.8:1:7州nglml 的可溶性自7-H3分子， 肠癌患者外周血中可溶性 B7-H3分子表达水平明显升高 (30.34士11.93ng!mD; 可熔性 B7-H3 分子在肠癌外周血中的表达水平与肠癌的淋巴结转移以及远处肝转移密切相 关;五株肠癌细胞株表面均存在不同程度的 B7-H3分子的表达，丁NF也能促进肿瘤细 胞分憾可溶性日机 H3分子，上调2Ig日7-H3mRNA的表达。肠癌细胞分泌可榕性日7-H3 分子可被MMPI抑制。 III{结论}可溶性的B7-H3分子存在于肠癌患者外周血及正常人外周血中，肠癌患 者外周可溶性