特发性血小板减少性紫癜cd4cd25cd127-及cd3cd4-cd8-调节性t细胞变化情况及意义-changes and significance of cd 4 cd 25 cd 127 - and cd 3 cd 4 - cd8 - regulatory t cells in idiopathic thrombocytopenic purpura.docxVIP

山西 山西医科大学硕士学位论文 II II 特发性血小板减少性紫癜 CD4+CD25+CD127-及 CD3+CD4-CD8-调节性 T 细胞变化情况及意义 专业：儿科血液 摘要 目的 研究特发性血小板减少性紫癜患儿外周血 CD4+CD25+CD127-及 CD3+CD4-CD8-调节 性 T 细胞（Treg）变化情况及意义。 材料与方法 1.实验对象:33 例 ITP 患儿和 21 例正常对照者，抽取外周血 1m1,以 EDTA 抗凝。2.检测指标:①染色:ITP 患儿及正常对照组儿童以 EDTA 抗凝的新鲜外周血 1m1, 试管 A 中加入三标记单克隆抗体(CD4-FITC/CD8-PE/CD3- PC5)10μl,试管 B 中加入分别加 入 CD4-PC5,CD25-FITC, CD127-PE 单克隆抗体 5μl，在每个试管中加抗凝全血 20μl 混匀。 避光 30 分钟。②溶血:每个试管再加入红细胞裂解液（溶血素）100μl，混匀，15 分钟后 以 1200 转/分离心 5 分钟，弃上清。③洗涤:在上述剩余液中加生理盐水 1m1，混匀，离心 (同上)，弃上清。④上机待检:在上述剩余液中加 0.5m1 生理盐水，上机待检。每个样本 获取 10000 个细胞，用流式细胞仪 CELLQUGST 软件检测其中 CD4