胃癌细胞sgc-7901在恒温热处理后hsps的表达变化及其临床意义-expression of hsps in gastric cancer cell sgc - 7901 after constant temperature heat treatment and its clinical significance.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要 ……………………………………………………………………1 英文摘要 ……………………………………………………………………4 缩略词表 ……………………………………………………………………6 前 言 ……………………………………………………………………7 材料与方法 …………………………………………………………………10 结 果 ……………………………………………………………………23 讨 论 ……………………………………………………………………34 结 论 ……………………………………………………………………40 参考文献 ……………………………………………………………………41 综 述 ……………………………………………………………………47 硕士期间撰写论文 …………………………………………………………52 致 谢 ……………………………………………………………………53 胃癌细胞在恒温热处理后 胃癌细胞在恒温热处理后 HSPs 的表达变化及其临床意义 胃癌细胞 SGC-7901 在恒温热处理后 HSPs 的 表达变化及其临床意义 专业名称：肿瘤学 申 请 人：屠以诺 导 师：崔书中 教授 中文摘要 研究背景 胃癌是人类最常见的恶性肿瘤之一，其发病率在所有恶性肿瘤中位列第四位。在 我国胃癌的男、女性发病率分别居各种恶性肿瘤发病率的第 2 和第 3 位。因其起病隐 匿，早期症状不明显，所以多数患者就诊时，肿瘤已处于中晚期，部分患者已有腹腔 转移，即使采取积极治疗的方法，但疗效仍不理想。胃癌组织通常首先在粘膜内蔓延、 扩散，突破粘膜层后向外依次侵犯粘膜下层、肌层、浆膜下层、浆膜层，突破浆膜层 后进而侵犯大、小网膜、腹膜、肝脏、胰腺、横结肠等邻近组织器官。当胃癌组织穿 透浆膜层后，肿瘤细胞可发生脱落并种植于腹膜，大、小网膜或其他脏器表面，形成 种植性转移结节。传统治疗方法对于胃癌腹腔种植转移疗效欠佳。胃癌腹腔转移出现 在胃癌晚期，预后极差。 腹腔热灌注化疗（h yp ert h ermi c i ntrap eri ton eal ch emot herap y ， HIPEC）作 为近年来新出现的一种治疗晚期腹腔恶性肿瘤的手段，引起了国内外学者的广泛关注。 其通过高温对肿瘤细胞的直接杀灭作用，高温与化疗的协同作用以及大流量灌注冲刷、 过滤作用有效地杀灭和清除腹腔内残留的癌细胞和微小转移灶（≤5mm），从而起到 能够预防和治疗腹膜转移癌的作用。该治疗方法具有较高的有效性及安全性，现已被 广泛应用于治疗进展期胃癌、结直肠癌、卵巢癌、腹膜假性粘液瘤等腹腔恶性肿瘤。 特别是在晚期胃癌合并腹腔广泛转移的患者身上取得了令人可喜的疗效。 热休克蛋白（Heat Shock Pro tei n ， HS Ps）是一类高度保守的蛋白，具有很强 的细胞内功能并被认为在各种应激反应中发挥着保护因子的作用。HSP70 是一类大分 子量的 ATP 依赖的分子伴侣。广泛参与细胞内蛋白质的合成、转移、装配等环节，促 1 PAGE 2 PAGE 2 万方数据 进细胞增殖。同时，热应激后各组织细胞受不同热作用均有新的蛋白质合成，其中以 70k Da 家族的热休克蛋白（HSP70）合成最多。因此，HSP70 被认为是最出色的的热 耐受预测因子。热休克蛋白 90 (heat sho ck p rotei n 9 0, HSP90 )是另一种大分子量的 热休克蛋白，具有维持蛋白稳定、促进细胞生长等功能，在细胞生长、发育、分化等 过程中发挥重要作用。 本课题旨在通过检测胃癌细胞 SGC-7901 在经过热处理后 HSP7 0 和 HSP9 0 的表 达变化情况并结合胃癌患者在接受热灌注治疗后血清中 HSP70 和 HSP90 的浓度变化 情况，探讨胃癌细胞在热处理后的热耐受情况，从而进一步为确定胃癌患者腹腔热灌 注化疗治疗间隔提供理论参考依据。 研究目的 研究胃癌细胞在接受热处理后 HSP70 和 HSP 90 的表达变化； 研究胃癌患者在接受腹腔热灌注化疗后血清中 HSP70 和 HSP9 0 的表达规律； 探讨胃癌患者接受腹腔热灌注化疗治疗的时间间隔以及腹腔热灌注化疗对胃癌细 胞侵袭、转移的影响。 研究方法 细胞学实验：选用 SGC-790 1 胃癌细胞株进行实验，该细胞株为低分化胃腺癌细 胞，为临床常见的胃癌组织学类型，具有较强的代表性。成功培养细胞后，用二氧化 碳培养箱 41℃对细胞进行热处理后继续培养，按照实验设计时间点取细胞样本利用 rt-PCR 以及 western -blo t 对 HSP70 和 HSP90 的表达情况进行检测。并且制作 SGC-7901 细胞爬片并同样进行热处理后按照不同时间点利用免疫组织