CD44V6cerbB2在卵巢癌中表达及其意义.docVIP

CD44V6cerbB2在卵巢癌中表达及其意义 　　【摘要】目的:分析CD44V6、c-erbB2在卵巢肿瘤中的表达及临床、病理联系。方法：免疫组织化学S-P连接法检测CD44V6、c-erbB2在10例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤、42例卵巢癌中的表达。结果：（1）CD44V6、c-erbB2在卵巢癌中的表达阳性率高于正常卵巢组织及良性肿瘤（P0.05）（2）CD44V6在卵巢癌中的表达与组织分化程度及淋巴转移有关（P0.05）；c-erbB2在卵巢癌中的表达与临床分期有关（P0.05）（3）CD44V6、c-erbB2在卵巢癌中共表达率与临床分期、组织分化程度及淋巴转移有关（P0.05）。结论: CD44V6、c-erbB2在卵巢癌中的表达与卵巢癌发生发展有关，这两种蛋白共表达可望成为卵巢癌不良预后指标。 　　【关键词】卵巢癌；免疫组织化学；CD44V6；c-erbB2 　　【中国分类号】R737.31【文献标识码】A【文章编号】1044-5511（2011）11-0013-02 　　 　　随着分子生物学的发展，目前认为恶性肿瘤的发生发展是多基因多步骤共同作用的结果［1］。CD44v6与恶性肿瘤侵袭和转移密切相关，被认为是肿瘤的特征性早期指标。原癌基因c-erbB2编码的蛋白，具有表皮生长因子受体的活性与功能，过表达于多种恶性上皮性肿瘤，与恶性肿瘤的发生发展以及预后有关。本研究通过免疫组织化学分析CD44V6与c-erbB2卵巢恶性上皮性肿瘤中的共表达及与临床、病理联系。 　　1.材料和方法 　　1.1标本:收集卵巢上皮性肿瘤共62例，其中卵巢良性上皮瘤20例，卵巢癌 42例。平均年龄49.5岁（22-70岁）。根据组织类型：浆液性癌34例，粘液性癌4例，透明细胞癌2例，内膜样癌2例。根据1985年FIGO分期：I期5例，II期7例，III期25例，IV期5例。根据分化程度；高分化癌（1级）17例，中分化癌（2级） 11 例，低分化癌（3级）14例。取正常卵巢组织10例作为对照。 　　1.2主要试剂:鼠抗人c-erbB2蛋白单克隆抗体（CB11），鼠抗人CD44V6蛋白单克隆抗体（2F10）， S-P超敏试剂盒均购至福州迈新生物技术开发公司。 　　1.3免疫组织化学技术:本研究采用免疫组织化学S-P连接法进行抗原检测。具体步骤如下：标本经10%中性福尔马林固定，石蜡包埋，连续切片4μm厚。切片常规脱蜡水化，用PBS液（PH7.4）冲洗三次，每次3分钟。采用柠檬酸缓冲液高温高压抗原修复法进行抗原修复。每张切片加入50μl过氧化酶阻断溶液（试剂A），室温下孵育10分钟。用PBS液（PH7.4）冲洗三次，每次3分钟。除去PBS液，每张切片加入50μl正常非免疫动物血清（试剂B），室温下孵育10分钟。除去血清，每张切片加入50μl一抗，室温下孵育60分钟。用PBS液（PH7.4）冲洗三次，每次3分钟。除去PBS液，每张切片加入50μl链霉菌抗生素-过氧化酶溶液（试剂D），室温下孵育10分钟。用PBS液（PH7.4）冲洗三次，每次3分钟。除去PBS液，每张切片加入100μl新鲜配制的DAB溶液，显微镜下观察10分钟。自来水冲洗，苏木素复染，自来水冲洗返蓝。梯度酒精脱水干燥，中性树胶封片。由有经验的病理医师读片。用已知阳性的卵巢癌组织切片同一条件下染色作为阳性对照，用PBS代替一抗作为阴性对照。 　　1.4结果判断:CD44V6、c-erbB2以细胞膜和/或细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性染色。采用双评分半定量法进行评分：51%细胞着色为3分；显色度按切片中细胞显色有无及深浅评分，无显色0分，浅棕黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；两组相加，0分判阴性（-），1-2分判阳性（+），3-4分判（++），5-6分判（+++）。 　　1.5统计分析:采用SPSS10.0统计软件分析：阳性率比较采用X2检验。 　　2.结 果 　　2.1CD44V6、c-erbB2在不同卵巢组织中的表达:不同组织中CD44V6的表达：阳性表达物分布于细胞膜，少数伴有胞浆着色。10例正常卵巢组织染色均阴性，良性上皮瘤阳性表达率1/20（5%），卵巢癌的阳性表达率达16/42（38.1%），其中14例染色强度（+），2例染色强度（++）与正常卵巢组织及良性上皮瘤相比差异显著（P0.05）。c-erbB2阳性染色与CD44V6相似，分布于细胞膜和细胞浆，呈局灶性或弥漫性分布。10例正常卵巢组织均阴性染色, 20例良性上皮瘤中4例阳性染色4/20（20.0%），两组相比差异无显著性（P0.05）；42例卵巢癌，14例染色强度（+），7例染色强度（++），6例染色强度（+++）阳性表达率27/42（64.29%），与正常卵巢与良性上皮瘤比，差异显