UbiquitinP33ING1b和P53蛋白在宫颈鳞癌中表达及意义.docVIP

UbiquitinP33ING1b和P53蛋白在宫颈鳞癌中表达及意义 　　摘要：目的 探讨宫颈鳞癌组织中ubiquitin、P33ING1b和P53蛋白的表达、临床意义及相互关系。方法 对45例宫颈鳞癌组织和33例宫颈上皮内瘤变组织采用免疫组化Envision法检测ubiquitin、P33ING1b和P53蛋白的表达，并选择15例正常宫颈组织作为对照，分析各指标间的相关性。结果 P33ING1b蛋白在对照组、CINⅠ-Ⅱ组、CINⅢ组和SCC组的阳性表达率依次为：100%、80.0%、72.3%和44.4%；P53蛋白在四组中的阳性表达率依次为：13.3%、26.7%、27.8%和73.3%；ubiquitin蛋白在四组中的阳性表达率依次为：46.7%、53.3%、66.7%和95.6%。三种蛋白在SCC组的表达和对照组相比均有显著性差异（P0.05）。P53和P33ING1b蛋白之间呈负相关（P0.05）。结论 ubiquitin、P33ING1b和P53蛋白表达异常对宫颈癌发生、发展可能起重要作用。 　　关键词：宫颈鳞癌；ubiquitin；P33ING1b；P53 　　宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，且近年年轻女性宫颈癌发病率呈上升趋势，严重威胁女性健康。宫颈癌病因目前尚未完全明确，研究认为其发生、发展与抑癌基因失活、癌基因激活以及细胞凋亡抑制密切相关。本文通过研究ubiquitin、P33ING1b和P53蛋白在宫颈鳞癌、宫颈上皮内瘤变和正常宫颈组织中的表达，探讨三者在宫颈鳞癌发生发展中的作用及临床意义。 　　1 资料与方法 　　1.1一般资料 选择2008年6月～2010年6月新疆石河子大学第一附属医院妇产科就诊的患者，行宫颈活检或手术治疗的子宫颈鳞癌标本45例，年龄29～74岁，平均年龄48.0岁。根据国际妇产科联盟（FIGO，2000年）的临床分期：Ⅰb期28例，Ⅱa期17例；高分化10例，中分化16例，低分化19例，患者术前近3个月内均未接受任何化疗和放疗。宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasms， CIN）组织33例，其中CINⅠ-Ⅱ15例、CIN-Ⅲ18例，正常宫颈组织15例。所有病例术后均经病理学确诊，临床和病理资料完整。 　　1.2主要试剂 兔抗人ubiquitin多克隆抗体和小鼠抗人P53单克隆抗体均购自abcam公司，羊抗人P33ING1b多克隆抗体购自Hypromatrix公司。EnvisionTM二步法试剂盒购自DAKO公司。 　　1.3方法 采用免疫组化Envision法，P33ING1b多克隆抗体工作浓度1：300；P53单克隆抗体工作浓度1：200；ubiquitin多克隆抗体工作浓度1：200。实验步骤按照实验说明书进行，用PBS代替一抗作阴性对照，用已知阳性组织切片作为阳性对照。 　　1.4结果判定 P33ING1b蛋白阳性表达位于细胞质或细胞膜，呈黄色至棕黄色。ubiquitin蛋白阳性表达位于细胞核或细胞质，呈棕黄色。P53蛋白阳性表达位于细胞核，也见于细胞质，呈棕黄色。每张切片随机选取4个高倍镜视野，结合着色范围和染色强度进行分级。着色范围以阳性细胞百分率判定：?10%为0分；10%～40%为1分；41%～70%为2分；?70%为3分。染色强度评分标准：不着色0分；黄色1分；棕黄色2分；黄褐色3分。两种评分相加，0～1分为（?）；2分为（?）；3～4分为（??）；5～6分为（???）。 　　1.5统计学分析 应用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。组间差异性比较采用χ2检验（χ2检验），相关性分析采用Spearman等级相关分析，P?0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 P33ING1b、P53和ubiquitin蛋白在宫颈组织中的表达 P33ING1b蛋白在宫颈组织中的阳性率逐渐降低（表1），差异有显著性意义（χ2=30.845，P=0.000）。与对照组相比，SCC组P33ING1b蛋白表达显著减少，有统计学差异（χ2=29.778，P=0.000），其余两组分别与对照组相比均无统计学差异，P0.05。 　　P53蛋白在宫颈组织中的阳性表达逐渐增加（表1），有显著性差异（χ2=32.618，P=0.000）。与对照组相比，SCC组P53蛋白表达显著增加，有统计学差异（χ2=18.424，P=0.000），其余两组均无统计学差异，P0.05。 　　Ubiquitin蛋白在宫颈组织中的阳性表达率逐渐增加（表1），有显著性差异（χ2=39.671，P=0.000）。SCC组的ubiquitin蛋白表达显著增加，和对照组相比有统计学差异（χ2=25.961，P=0.000），而其余两组与对