JAM―1在子宫内膜癌组织中表达及意义.docVIP

JAM―1在子宫内膜癌组织中表达及意义 　　[摘要]目的 探讨JAM-1在不同肌层浸润深度的子宫内膜癌组织中的表达及意义。方法 73例子宫内膜癌患者，其中癌细胞无肌层浸润18例，浅层浸润38例，深层浸润17例，采用免疫组化法检测JAM-1在无、浅、深三组浸润深度的表达情况。结果 JAM-1表达在子宫内膜癌癌细胞、腺细胞的胞膜及胞浆，随肌层浸润程度的增加JAM-1的表达显著减弱，差异有统计学意义（P0.05）。结论 子宫内膜癌JAM-1的表达与癌细胞的浸润程度呈反比，提示JAM-1可能与子宫内膜癌的浸润、侵袭相关。 　　[关键词]子宫内膜癌；连接黏附分子1；肌层浸润 　　[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 2095-0616（2014）06-17-04 　　子宫内膜癌（endometrial carcinoma）是发生于子宫内膜的一组上皮性恶性肿瘤，以腺癌最常见。是女性生殖系统的三大恶性肿瘤之一，占全身恶性肿瘤的7%～8%。近年来其发病率呈上升趋势[1]。子宫内膜癌在后期向肌层、宫颈、阴道侵润，而肌层浸润深度是影响子宫内膜癌的因素之一。连接黏附分子1（junctional adhesion molecule 1，JAM-1）参与构成上皮及内皮间的紧密连接复合物，在肿瘤组织癌巢的形成、血管及淋巴管的新生过程中发挥一定的作用[2]。刘艳翠等[3]研究发现在小鼠胃癌组织中JAM-1表达降低，猜想JAM-1可能通过降低细胞间的黏附促进胃癌的转移、侵袭。然而其在女性生殖系统肿瘤中特别是子宫内膜癌组织中的表达，与肌层侵润深度的关系，是否参与肿瘤的侵袭、扩散目前尚无明确的报道。本文借助免疫组化 　　方法初步检测JAM-1在不同肌层浸润深度的子宫内膜癌组织中表达情况，探讨其在肿瘤发生发展的作用，为疾病的诊断或防治提供新的思路。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　收集长治和平医院2012年10月～2013年10月经手术治疗的子宫内膜癌患者 73例，平均年龄51岁，术后均经病理组织学检查确诊，术前均未接受激素治疗或放化疗，且全身未合并糖尿病或其他肿瘤。参照国际妇产科联盟（FIGO）制定的子宫内膜癌手术病理分期将标本分为三组：A组18例，肿瘤仅限于子宫内膜无肌层浸润；B组38例，肿瘤浸润深度1/2肌层为深层浸润。A组平均年龄（51.4±10.1）岁，B组（50.7±10.4）岁，C组（49.9±10.7）岁，三组患者在年龄方面无显著统计学差异（P0.05）。 　　1.2 试剂与设备 　　兔抗人JAM-1多克隆抗体购自北京博奥森生物技术有限公司，即用型二抗试剂盒、加强型DAB显色试剂盒由福州迈新生物技术有限公司生产，山羊血清封闭液购自武汉博士得生物技术有限公司，PBS缓冲液、枸橼酸盐修复液、显微镜、图像采集及分析仪等由和平医院病理科提供。 　　1.3 标本处理 　　手术切除标本固定在足量10%福尔马林固定液，固定时间不小于2h，常规石蜡包埋，垂直子宫内膜连续5μm切片。 　　1.4 实验方法 　　实验采用免疫酶法二步法检测JAM-1在不同浸润深度癌组织中的表达，参照试剂盒说明书进行试验，主要操作步骤如下：切片以二甲苯脱蜡，梯级乙醇脱水，滴加3% H2O2 15min以阻断内源性过氧化氢酶，PBS缓冲液清洗后加入枸橼酸盐溶液中加热1分30秒，室温冷却，滴加山羊血清封闭液室温孵育20min，甩掉封闭液滴加一抗（工作浓度为1∶200）后放入4℃冰箱中过夜。第2日PBS清洗切片后加过氧化物酶标记二抗常温下孵育15min，滴加二氨基联苯胺（DAB）显色，显微镜下观察显色，及时自来水终止。苏木素复染，清水冲洗，连过3次二甲苯，梯度酒精脱水，通风橱中风干，滴加中性树胶，盖上盖破片封片，在高倍显微镜下观察组织染色情况并照相。对照组为PBS缓冲液代替一抗。 　　1.5 结果判定 　　JAM-1表达阳性颗粒为棕黄色或黄褐色，表达部位为细胞膜或细胞浆。在400倍显微镜下观察根据染色深浅及阳性细胞百分率综合评价评分：基本不着色为0分，黄色为1分，棕黄色为2分，黄褐色为3分；选取一个高倍镜视野，每个视野计数100个细胞，计算阳性细胞率，阳性率10%计0分，10%～40%计1分，40%～70%计2分，≥70%计3分。以上两评分相加，总分0～1分为阴性（-），2分为弱阳性（+），3～4分为中等阳性（++），5～6分为强阳性（+++）。综合阳性率以+～+++作为阳性计算。 　　1.6 统计学处理 　　采用SPSS19.0统计软件，率的比较用x2检验或四格表的Fisher确切概率法，检验水准是α=0.05，P0.05时有统计学差异。 　　2 结果 　　免疫组化结果显示JAM-1主要表达在子宫内膜癌组织中