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EB病毒对结核感染T细胞试验检测影响
EB病毒对结核感染T细胞试验检测影响
[摘要]目的探讨EB病毒感染对结核感染T细胞试验的影响。方法选取2015年1~12月昆明医科大学第一附属医院疑似结核感染的患者246例,采集外周血同时进行结核感染T细胞试验和EB病毒核酸检测,分析结核感染T细胞试验的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比。结果结核感染T细胞试验的灵敏度为83.87%,特异性为93.49%,准确度为92.27%,阳性预测值为65%、阴性预测值为97.57%,阳性似然比为12.88,阴性似然比0.17,约登指数为0.77。EB病毒再激活与结核感染性T细胞斑点试验间有显著性差异(P=0.0210.05)。结论结核感染T细胞试验对结核感染的诊断特异性较高,具有较好的临床应用性能,EB病毒再激活??影响结核感染T细胞试验。
[关键词]结核;结核感染T细胞试验;EB病毒;γ干扰素
[中图分类号]R446.6 [文献标识码]A [文章编号]2095-0616(2017)17-168-04
我国是结核病高发国家之一,据2010年全国结核病流行病学估算,全国≥15岁人口中活动性肺结核患者高达499万,尽管活动性肺结核的患病率有所下降,但由于人口数量增加,实际患肺结核的人数较2000年反而有所增加。据世界卫生组织报道,结核病诊断率仅为37%,结核病诊断率低的主要原因是很难找到病原学证据,即使在发达国家结核病的诊断也仅有50%具有细菌学证据支持。因此,寻求一个敏感度及特异度均较高的非病原学检测方法具有重要的临床意义。结核感染T细胞试验(T-SPOT.TB)是(ELISPOT)检测结核感染的新方法,该试验是以结核杆菌特异性抗原刺激T细胞,如果患者感染过结核杆菌则会释放γ干扰素,从而可以通过ELISPOT技术进行检测。T-SPOT.TB试验的检测主要通过抗原刺激记忆性T细胞释放γ干扰素,因此影响γ干扰素释放的因素可能会对检验结果产生影响。研究发现EB病毒能抑制干扰素的生成,EB病毒的一种蛋白具有类似ILl0的功能,它能抑制IFN-γ的合成和CD8+细胞毒性T细胞反应,因此EB病毒感染可能会对结核感染T细胞试验造成影响,本文拟分析结核感染T细胞试验的临床性能并评价EB病毒感染对此实验检测结果的影响。
1资料与方法
1.1一般资料
选取2015年1~12月昆明医科大学第一附属医院住院疑似结核患者267例,收集每位患者临床资料以及既往结核病史、结核接触史、以及其他疾病和治疗史。根据肺结核诊断和治疗指南,根据临床资料确诊结核患者31例,其中男性18例,女性13例,年龄中位数32.5岁。排除结核病人215例,其中男性131例,女性84例,年龄中位数37岁。EB病毒感染组,EB-DNA≥400拷贝/mL12例,其中9例确诊结核。
1.2T-SPOT.TB检测方法
采用T-SPOT.TB试剂盒(英国牛津),根据说明书进行操作。
1.3 EB-DNA定量检测
荧光定量PCR仪购自美国ABI公司(ABI-7300),全血DNA基因提取试剂购自天隆科技公司,EB-DNA定量检测试剂购自湖南圣湘科技有限公司。DNA提取和扩增均按厂家试剂说明书进行。
1.4 ELISA法检测抗-EA IgG
用德国IBL公司的成套试剂盒,按说明书操作,测定的吸光度,抗-EA IgG的吸光度值0.5为阳性。
1.5统计学处理
计算灵敏度、特异性、准确度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比、阴性似然比采用SPSS19.0统计软件进行数据处理及统计学分析,计数资料采用x2检验,当观察例数小于4例时采用Fisher精确概率计算,P0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1T-SPOT.TB试验的临床性能评价
结果表明T-SPOT.TB试验的灵敏度为83.87%,特异性为93.49%,准确度为92.27%,阳性预测值为65%、阴性预测值为97.57%,阳性似然比为12.88,阴性似然比0.17,约登指数为0.77。见表1。
2.2EB病毒载量对T-SPOT.TB试验的影响
EB病毒感染组和非感染组间T-SPOT检测结果间无显著影响(P=0.697)。见表2。以抗-EA为EB病毒再激活的标记,结果表明EB病毒再激活与T-SPOT检测结果差异有统计学意义。见表3。
3讨论
人体初次感染结核分枝杆菌后,外周血中的T细胞发生致敏转化,形成记忆性T淋巴细巴细胞,当再次接触结核分枝杆菌时,记忆性T淋巴细胞能够迅速活化增殖,从而引起γ干扰素释放。T-SPOT.TB法即是基于以上原理,以ESAT-6(Rv3875)和CFP-10(Rv3874)肽段库作为刺激原,检测外周血中具有促进γ干扰素
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