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Cocktail探针药物法评价CYP450酶研究进展 　　摘要：“Cocktail”鸡尾酒探针药物法是一种给予两种或多种的探针药物的方法。“Cocktail”探针药物法作为一种快速、有效的评价药物对CYP450酶活性影响的方法，有着不可替代的优势和广阔的应用前景。本文综述了国内外运用“Cocktail”探针药物法评价其在人体和动物中CYP450酶应用，了解此方面的研究进展。 　　关键词：Cocktail；探针药物法；动物模型； 　　探针药物法即某些经细胞色素P450代谢的药，以其代谢物与原型药的比例或速率衡量酶代谢能力变化的方法。最初主要评价药物在体内代谢方面的相互作用。现在“Cocktail”探针药物法则应用更为广泛，它可以用于体内外细胞色素P450酶的代谢活性。对体内药物代谢活性的定量测定更具有广泛的应用价值。它可以用于研究代谢酶活性与疾病之间的关系，研究药物间的相互作用，同时也可以应用在遗传变异的研究中。不仅如此，随着多种新的探针药物组合出现，该方法也在临床研究中得到了应用。如使用“Cocktail”探针药物来证明某些疾病的假说和评价肾功能的改变等[1]。 　　1.“Cocktail”探针的方法学研究特点 　　“Cocktail”探针用于体内药物酶代谢研究，可以采用探针药物的清除率或者探针药物与代谢产物在血浆中，尿液中和唾液中的浓度比值等指标来评价酶的活性，采用液相色谱或者液相色谱质谱串联法进行测定[2]。 　　一个理想的用于体内药物代谢酶活性测定的“Cocktail”探针要求具备以下条件[3]： 　　（1） 探针药物可得而且易得，能被特定的亚型催化或者即使被几种亚型催化但已确知其各种代谢途径及产物。 　　（2） 为有效的评估同时使用探针底物后的药动学变化，必须保证每种探针药物有选择地作用于一种同工酶，具有高度敏感性，即使被其他几种亚型催化但已确知其各种代谢途径及产物。 　　（3） 在抑制药存在的条件下，探针药物在高浓度下仍维持其作用专属性，不发生对其他同工酶的抑制作用。 　　（4） 活体中在给予的剂量下其代谢应遵循一级动力学变化，并且其代谢不受肝血流和蛋白结合的影响。 　　（5） 给药和采量应简单和无损害，在给药剂量下应确保安全。 　　（6） 在给予的剂量下应对所检测的亚型的活性无影响。 　　（7） 不存在对潜在的对分析方法的干扰。 　　2.“Cocktail”探针的应用 　　2.1. 探针法在国外应用 　　细胞色素P450酶系是人体内最重要的药物代谢酶，它由一系列的同工酶组成。与药物代谢相关的同工酶有CYP1A2，CYP2A6，CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6， 　　3A4[2]。据西北大学王玲玲等报道，其中有55%的药物是由CYP3A4代谢，20%由CYP2D6代谢，20%经CYP2C9和CYP2C19代谢。细胞色素P450可受多种因素的影响，尤其是药物，可显著影响药酶的活性，使其诱导或抑制，并加速或缓解底物和其他药物的代谢，这些构成了药物体内的过程和药物相互作用的主要机制[4]。 　　探针药物法是指某些经P450代谢的药物，以其代谢物和原型药的比例或者速率来衡量酶代谢能力变化的方法。在细胞色素P450中，研究药物代谢酶的活性和评价药物间是否存在相互作用。药物探针法直接测定体内药物酶代谢活性，它不仅考虑了基因还考虑了环境因素对代谢酶活性的影响，鸡尾酒探针可以同时评价多种药物代谢酶的活性，它与单独使用一种探针药相比具有很多的优点，如可以降低个体内和个体间的药物代谢酶活性变异的影响，同时还可以缩短分析周期降低实验费用。使用“Cocktail”探针法评价药物酶在体内主要药物代谢酶的作用成为了药物间相互作用的一个筛选工具。一般首先要进行体外实验，如果发现该药物抑制或诱导主要酶代谢产物，则进行体内试验。如Shelepova T等人采用经过验证有效的“5+1 Cocktail”（右美沙芬，咖啡因，奥美拉唑，咪达唑仑，华法林和维生素K）评价三相口服避孕药对几种药物代谢酶活性的影响，结果发现口服避孕药后CYP1A2和CYP2C19的活性降低[5]。 　　2.2.探针法在国内的应用 　　“Cocktail”探针在我国也用于评价中药制剂是否改变CYP的活性，如使用Cocktail评价藤黄酸对肝细胞色素P450酶亚型的影响：采用咖啡因，氯唑沙宗和氨苯砜3种Cocktail探针药物的测定方法进行改进，研究藤黄酸对3种主要代谢酶CYP1A2，CYP3A4和CYP2E1活性的影响，结果发现藤黄酸对CYP1A2，CYP3A4无明显差异，但对CYP2E1亚型具有明显的诱导作用，使该亚型的活性明显增强[6]。振源胶囊在对大鼠CYP1A2有诱导作用，对CYP3A4有抑制作用，而对CYP2E1无明显作