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MALDI―TOF―MS技术在血液系统疾病中应用进展
MALDI―TOF―MS技术在血液系统疾病中应用进展
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2014.11.1
摘 要 蛋白质是人类执行生命活动的直接载体,对于蛋白质的深入研究,不但有助于全面阐释生命活动的本质,而且对于研究疾病发生机制、提前预警以及诊断疾病、疗效的预后预测均具有重要意义。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术是目前蛋白质组学研究中经常用到的质谱研究技术之一,已经广泛应用于临床研究。现就其在血液系统疾病中的应用进展进行总结。
关键词 MALDI-TOF-MS 血液系统疾病 应用进展
Application progress of MALDI-TOF-MS technology in the blood system diseases
Zhang Qingyi
Department of Hematology,the Peoples Liberation Army General Hospital(Beijing) 100853
Abstract Protein is the direct carrier of human life activities.For depth research on protein,it not only helps to explain the essence of life activity,but also have important significance on the study of the mechanism of diseases,early warning,diagnosis of the disease and the prediction of curative effect.At present,matrix assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry(MALDI-TOF-MS) technology is one of the frequently used mass spectrometry techniques in proteomics research.It has been widely used in clinical research.We summarize the application progress of it in the blood system diseases.
Key words MALDI-TOF-MS;Blood system diseases;Application progress
对于蛋白质的深入研究,不但有助于全面阐释生命活动的本质,而且对于研究疾病发生机制、提前预警以及诊断疾病、疗效、预后预测均具有重要意义[1]。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术是目前蛋白质组学研究中经常用到的质谱研究技术之一,从中可以寻找疾病相关的生物标志物[2]。近年来已有多位学者将其应用于血液系统疾病的诊断及监测中,现就其在血液系统疾病中的应用进展进行总结。
MALDI-TOF-MS技术
技术组成:主要有三部分构成:①基质:主要作用是在吸收激光能量同时使待测的样品分子转化成离子,即样品分子的离子化。②基质辅助激光解吸电离离子源(MALDI):MALDI的作用原理是样品与基质形成的共结晶薄膜受到激光照射后,基质吸收激光能量并将其传递给生物分子,而电离过程中将质子转移到生物分子或从生物分子得到质子,从而使生物分子电离。③飞行时间质量分析器(TOF):TOF的作用原理是气化状态下的离子在电场作用下加速飞过飞行管道,根据到达检测器的飞行时间不同而被检测,即测定离子的质荷比(M/Z)与离子的飞行时间。
基本原理:将磁珠分选后的含有微量蛋白质的样本分散在过量的小分子基质中,将混合液体点到样品靶上,静置风干后放入离子源内;当靶点受到激光照射时,基质吸收激光的能量跃迁到激发状态,样品解吸附,基质-样品之间发生电荷转移使得样品分子电离和气化,在高电压场内,将电离的样品分子从离子源转送到质量分析器内,根据到达检测器的飞行时间不同(即通过离子的质量电荷之比(M/Z)与离子的飞行时间成正比来分析离子,并测得样品分子的分子量),经离子检测器及计算机数据处理得到肽质量指纹图谱。由于每种蛋白质都有不同的氨基酸序列(一级结构),蛋白质酶解产生的肽片断序列也不全相同,其肽混合物质量数具有特征性。比较质谱分析中所得的肽质量指纹谱与多肽蛋白数据库中蛋白质的理论肽段,就可以对所测蛋白质进行鉴定。
MALDI-TOF-MS在
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