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TDZ和暗培养对蝴蝶兰叶片不定芽发生影响 　　摘 要 以蝴蝶兰幼嫩花梗诱导的无菌苗叶片为外植体，以MS为基本培养基，研究不同暗培养时间和TDZ浓度对蝴蝶兰叶片诱导不定芽的影响。结果表明：暗培养和TDZ对接种的蝴蝶兰叶片的成活率均具有显著影响，暗培养60 d时，叶片的存活率在90%以上，而在同一暗培养时间条件下，叶片的存活率随着TDZ浓度的增加而上升；在TDZ浓度为3.0 mg/L，暗培养60 d时，蝴蝶兰存活叶片不定芽的诱导率最高，达到93.45%；诱导的不定芽数最多，平均每个外植体诱导的不定芽数为13.22个。综合考虑外植体的成活率、不定芽诱导率和诱导的不定芽数，蝴蝶兰叶片诱导不定芽的最佳条件为：MS+TDZ 3.0 mg/L，暗培养60 d。 　　关键词 蝴蝶兰 ；叶片 ；不定芽 ；TDZ ；暗培养 　　分类号 S682.31 　　Abstract Used leaves of in vitro plantlets which induced from young pedicels of Phalaenopsis as explants and the MS as basal medium， the effect of dark culture phase and TDZ on adventitious shoot induction from leaves of Phalaenopsis were investigated. The result showed that： dark culture and TDZ had a significant impact on survival rate of inoculated leaves， and the survival rate was more than 90% when the dark culture phase was 60 d， the survival rate increased with the increase of TDZ concentrations under same dark culture phase； The highest inductivity of 93.45% and maximum average number of adventitious shoots were obtained on the MS medium supplemented with 3.0 mg/L TDZ and under 60 d dark culture. Considering of survival rate， regeneration rate and adventitious shoot number， the optimum culture condition for adventitious shoots induction from leaf explants of Phalaenopsis was MS appended with 3.0 mg/L TDZ and 60 d dark culture treatment. 　　Keywords Phalaenopsis ； leaf ； adventitious bud ； TDZ ； dark culture 　　蝴蝶兰为兰科蝴蝶兰属植物，是兰科中最具观赏价值的花卉之一，因其花型奇特、色彩丰富、花期持久，在热带兰中具有“兰花皇后”的美称，在国内外花卉市场极受欢迎[1]。蝴蝶兰在商业生产中需要大量的种苗，但蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株极少发育侧芽，较难进行分株繁殖。因此，组织培养是蝴蝶兰种苗高效繁育的重要手段[2]。蝴蝶兰通过组织培养获得大量种苗的方式主要有2种：一是通过无菌播种获得；二是通过外植体诱导产生原球茎或丛生芽，再通过原球茎或丛生芽增殖培养从而获得大量幼苗。商业生产中的蝴蝶兰大多是杂交品系，因此前者虽然简单易行，可短期内获得大量幼苗，但其后代变异率高，难以获得品质整齐的大规模种苗；后者变异率低，原球茎或丛生芽增殖系数高，幼苗品质较一致，适合商业生产种苗的大规模繁育。近年来，蝴蝶兰在茎尖[3-4]、花梗腋芽[4-5]、花梗节间段[6-7]、根尖[8-9]及根段[10]的组织培养上已经取得了很大进展。但以茎尖为外植体，不仅外植体材料少，还会因切取茎尖而损伤母株；以花梗作为外植体在取材时间上受到限制；以根尖和根段作为外植体诱导原球茎困难，诱导率低。叶片虽是蝴蝶兰组培快繁最好的外植体材料，但叶片诱导原球茎较为困难。目前，蝴蝶兰叶片诱导不定芽的组培快繁虽有少量研究[11-12]，但缺少针对某一特定条件深入系统的研究。本研究以蝴蝶兰叶片为外植体，对影响蝴蝶兰叶片诱导不定芽的