TNF―α诱导人肺鳞癌细胞发生EMT促进转移机制研究.docVIP

TNF―α诱导人肺鳞癌细胞发生EMT促进转移机制研究 　　[摘要]目的 明确TNF-α引起人肺鳞癌细胞发生EMT改变并促进肿瘤细胞侵袭、转移的潜在相关机制。方法 采用TNF-α处理后的人肺鳞癌SK-MES-1细胞，通过划痕-愈合实验、Transwell实验方法检测肿瘤细胞运动、迁移及侵袭能力，采用Western blot方法检测细胞是否发生EMT（标志物Vimentin和E-cadherin）改变。结果 TNF-α能促进人肺鳞癌SK-MES-1细胞的运动、迁移、侵袭能力，且能使细胞发生EMT改变，上皮标志物E-cadherin降低，间充质标志物Vimentin表达升高。结论 TNF-α能够诱导人肺鳞癌SK-MES-1细胞发生EMT改变从而具有更强的转移能力。 　　[关键词]肺鳞癌；TNF-α；EMT；转移 　　[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2017）06（a）-0013-04 　　[Abstract]Objective To clarify the potential mechanism of TNF-α inducing human squamous cell carcinoma of lung to produce EMT changing and promoting the invasion and metastasis of carcinoma cells.Methods SK-MES-1 cells of Human lung squamous cell carcinoma treated with TNF-α，and the motion，migration and invasion ability of lung cancer cells were detected by Scratch-wound assay and Transwell chamber assay，and Western blot was performed to examine whether the cell producing EMT change or not （markers Vimentin and E-cadherin）.Results TNF-α could promote the motion，migration and invasion ability of SK-MES-1 cells of Human lung squamous cell carcinoma，and could make the cell produce EMT change，the epithelial marker （E-cadherin） decreased and the expression of the mesenchymal marker （Vimentin） increased.Conclusion TNF-α can induce EMT change in squamous cell carcinoma of lung and promote metastasis. 　　[Key words]Squamous cell carcinoma of lung；TNF-α；EMT；Metastasis 　　肺癌是全球范??内较为常见的恶性肿瘤类型，在我国其发生率及死亡率均位居恶性肿瘤首位。肺癌中非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer， NSCLC）占80%以上，包括腺癌、鳞癌和大细胞癌等[1]。虽然现代医疗技术飞速发展，但是大多数患者在确诊时已为中晚期，失去手术切除治愈的机会[2]，且术后患者复发及远处转移率高[3]，导致肺癌的治疗效果差，5年生存率较低[4]。 　　上皮细胞间充质转化（EMT）的发生在肿瘤转移中发挥重要作用，TNF-α能促进多种肿瘤的侵袭和转移[5-6]，其机制可能与EMT的发生有关，本实验研究意在探讨TNF-α对人肺鳞癌SK-MES-1细胞发生EMT及侵袭转移能力的影响，并了解其内在可能的机制。 　　1 材料与方法 　　1.1 细胞的培养 　　人肺鳞癌SK-MES-1细胞株在37℃条件下在浓度为5%的 CO2培养箱中放入含有胎牛血清的培养基中，进行传代培养，每周2～3次。以人肺鳞癌SK-MES-1细胞为实验材料，TNF-α（10 ng/ml）处理组为实验组，TNF-α（-）未处理组为对照组。 　　1.2 细胞划痕-愈合实验观察TNF-α（10 ng/ml）对人肺鳞癌SK-MES-1细胞的运动能力的影响 　　①实验组：TNF-α（10 ng/ml）处理组；对照组：TNF-α（-）未处理组。 　　②常规细胞培养，取对