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不同方法提取荸荠皮中多酚含量的比较 　　摘要：采用正交试验研究了不同方法提取荸荠（Heleocharis dulcis）皮中多酚的最佳条件。结果表明，微波辅助法提取的多酚最多，最佳工艺为乙醇体积分数60%，微波功率为350 W，提取时间为5 min，料液比为1∶30（g∶mL），在该条件下多酚平均得率最高，达到2.86%；其次是超声波辅助法提取，最佳工艺为乙醇体积分数60%，料液比1∶30（g∶mL），提取温度60 ℃，提取时间50 min，在该条件下多酚平均得率为2.51%；加热法提取多酚得率最低，最佳工艺为乙醇体积分数60%，料液比1∶30（g∶mL），提取时间4 h，提取温度60 ℃，该条件下多酚平均得率为1.96%。3种方法提取的多酚得率不同，各有优缺点，可根据实际需要选择。 　　关键词：荸荠（Heleocharis dulcis）皮；多酚；加热提取；微波；超声波 　　中图分类号：S645.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2016）13-3426-04 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.13.039 　　荸荠（Heleocharis dulcis），又名马蹄，是莎草科荸荠属多年生草本植物，也是一种常见的天然经济作物，在中国长江流域以南各省均有栽培。荸荠作为一种优良的药食同源果蔬食物，自古就有“地下雪梨”和“江南人参”的美誉[1，2]。目前，中国荸荠栽培面积约为3.5万hm2，每667 m2产量最高可达4 000 kg，每年的产量约为7.5×105 t，产量占世界荸荠产量的95%以上[2，3]。荸荠皮中含有抗菌成分荸荠英，对多种细菌均有不同程度的抑制作用，其主要成分为酚类、生物碱、有机酸、皂苷及游离黄酮类等，荸荠皮中还含有丰富的水溶性棕色素和膳食纤维[4]。荸荠皮是加工的副产品，其质量占鲜荸荠的20%～25%[1]，通常被丢弃。如果能将这些废弃物加以处理，提取荸荠皮中的多酚、黄酮、荸荠皮色素等物质[5]，可用于食品的保鲜和天然的食品添加剂以及保健品的开发。同时增加了荸荠种植的产品附加值，提高种植户的经济效益。近年来研究发现，一些农业、食品工业副产品的提取物中也含有丰富的多酚类物质，其中有些提取物中多酚含量很高[6-12]。目前，对荸荠皮中多酚的研究却鲜见报道[13-16]。本试验旨在探讨采用加热、超声波辅助、微波辅助等提取方法提取荸荠皮中多酚类物质的条件及3种方法的比较，方便后期根据不同需要选择合适的提取方法。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　1.1.1 材料来源 荸荠（广西产），从武汉菜市场收集荸荠皮，剔除杂质，洗净，在恒温烘干箱内以50 ℃烘干，用微型植物粉碎机粉碎备用。 　　1.1.2 主要仪器与试剂 RE-2000A型旋转蒸发器（上海亚荣生化仪器厂）；SHB-ⅢA型循环水式多用真空泵（上海豫康科教仪器设备有限公司）；FZ102型微型植物粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司）；2K-60AB型电热真空干燥箱（上海申光仪器有限公司）；DHP120型恒温培养箱、ZKF030型电热真空干燥箱（上海实验仪器厂有限公司）；JA5003B型电子天平（上海越平科学仪器有限公司）；HH-4型数显恒温水浴锅（国华电器有限公司）、752型分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；微波炉（格兰仕微波炉有限公司）。 　　无水乙醇，碳酸钠，没食子酸，Folin试剂，均为分析纯。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 荸荠皮多酚提取正交试验 称取荸荠皮粉末5.000 g若干份，按照正交设计（表1、表2、表3）的条件向试验材料中加入一定体积分数的乙醇，按照不同的提取方法提取荸荠皮中的多酚。加热完成后将其在负压条件下过滤取滤液。收集滤渣加入第一次提取体积80%的乙醇进行二次浸提，再次负压抽滤取滤液，两次滤液混合保存备用。再取0.1 mL样品用分光光度计在765 nm波长处测定其吸光度并记录，每间隔15 min记录一次吸光度，记录1 h。 　　1.2.2 没食子酸标准曲线的绘制 准确吸取浓度为226 μg/mL的没食子酸标准溶液0、0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30 mL于容量瓶中，分别加入去离子水2.00、1.95、1.90、1.85、1.80、1.75、1.70 mL，再加入Folin试剂1.00 mL，充分振荡后静置3～4 min，分别加入1.00 mL的10%Na2CO3，定容至10 mL，振荡后于沸水浴中水浴1 min，同时设置试剂空白对照，在765 nm下测定吸光度。以吸光度为纵坐标，没食子酸标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线，求回归方程。 　　1.2.3 多酚含量测定