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不同炮制方式海马的蛋白质差异分析 　　摘要：探讨不同处理方式海马蛋白的差异，并对其部分生化特性进行研究。利用硫酸铵分步沉淀、聚丙烯酰胺凝胶电泳法（SDS）、bandscan软件、红外图谱对蒸馏水复水，醋酸铵复水，烘烤炮制获得的海马蛋白质进行比较分析。结果发现，烘烤炮制的海马蛋白质结构被破坏，凝胶图谱无条带，而不同复水方法凝胶图谱具有显著差异；通过计算分子量得知海马中蛋白质主要为肌肉蛋白质中的肌浆蛋白与肌原纤维蛋白；对海马蛋白质的红外指纹图谱进行分析，海马不同处理方式提纯后的蛋白质与烘烤炮制的海马全蛋白质的图谱存在区别。 　　Abstract： To investigate the difference of hippocampal proteins by difference processing pathways and to study its biochemical properties. Analysis on characteristic from hippocampal protein by difference processing pathways（rehydration by water， rehydration by ammonium acetate， processing by bake） by method of fractional precipitation， SDS， bandscan5.0， Infrared spectrometry. It was found that the protein form hippocampus which processing by bake structure was destroyed， there was no gel band pattern. The protein of hippocampal rehydration by water was different from rehydration by ammonium acetate significantly. Calculated molecular weight of the protein in the hippocampus，we can known that the major protein in hippocampus were SPP and MFP. There were some differences between the IR spectra of hippocampus proteins by difference processing pathways 　　关键词：海马；蛋白质；提取分离；SDS 　　Key words： hippocampus；protein；extraction and separation；SDS 　　中图分类号：R283 文献标识码：A 文章编号：1006-4311（2015）27-0163-06 　　0 引言 　　海马是一种经济价值较高的名贵中药，具有强身健体、补肾壮阳、舒筋活络、消炎止痛、镇静安神、止咳平喘等药用功能，现代药理学研究证明，海马具有镇静作用、激素样作用、抗肿瘤作用、抗炎作用、抗血栓作用、抗衰老作用、抗疲劳作用、以及增强学习记忆功能等。近期试验发现分离自海马的蛋白质能特异性结合于中枢神经膜蛋白，抑制氯离子通道的开启，对受体激动剂有拮抗作用。因此分离自海马的功能蛋白有可能成为镇静催眠的新型蛋白类药物。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料与仪器 　　1.1.1 实验原料 成年三斑海马（Hippocampus trimaculatus Leach），由中渔（福建）海洋生物科技有限公司提供。 　　1.1.2 实验试剂 SDS相对分子质量（10kDa-170kDa）标准蛋白，购买于上海威奥生物科技有限公司；电泳所用试剂：30%丙烯酰胺（Acr）、10%SDS（十二烷基磺酸钠）、1.5mol/L Tris-HCl缓冲液；pH8.8、1.0mol/L Tris-HCl缓冲液；pH6.8、10%过硫酸铵；TEMED（四甲基乙二胺）；浓缩电极缓冲液为15.1gTris、94g甘氨酸、5g SDS，用水溶解至1000mL；染色液为0.1%的考马斯亮蓝R250，40%的乙醇，10%的冰醋酸；脱色液为10%的乙醇，10%的冰醋酸等其他其他分析纯化学试剂。 　　1.1.3 实验仪器 电热鼓风干燥箱DHG-9070A；组织捣碎机（EJ 200-S）；聚丙烯酰胺垂直电泳装（Bio-Rad）；冷冻干燥机（Virtis 2K）；电泳凝胶成像分析系统；真空干燥箱DZF- 6020；PHS-3C型精密PH计；磁力加热恒温搅拌器；DYCZ-2