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不同炮制方法对北柴胡中柴胡皂苷d的含量影响 　　摘 要：本文对不同炮制工艺对北柴胡中成分含量的影响进行研究。固定相为：依利特hypersil BDS C18色谱柱（4.6*250*5u），以乙腈、水梯度洗脱为流动相，检测波长为203nm；柴胡皂苷d在50～950μg?mL-1范围内呈良好的线性关系。本法简便、重现性好、回收率高，可用于不同北柴胡炮制品中柴胡皂苷d的含量测定。 　　关键词：北柴胡；炮制；测定 　　北柴胡（BupleurumchinenseDC.）别名：硬苗柴胡（东北药用植物图志）、竹叶柴胡（植物名实图考）、韭叶柴胡（安徽）、津柴胡等。北柴胡分布于我国东北、华北、华东、中南、西南及陕西、甘肃等地。柴胡属多年生草本药用植物，能解表和里、升阳、疏肝解郁。柴胡主治感冒、上呼吸道感染、肋痛、肝炎、胆道感染、胆囊炎、疟疾、寒热往来、脱肛等。《本草正义》记载：“约而言之，柴胡主治，止有二层，一为邪实，则为外邪之在半表半里者，引而出之，使达于表而外邪自发；一为正虚，则为清气之陷于阴分者，举而升之，使返其宅，胃中气自振。”本文对不同炮制工艺对北柴胡中成分含量的影响进行研究。 　　1 仪器与试药 　　1.1 仪器RephiLe Direct-Pure Genie 超纯水系统（上海乐枫生物科技有限公司）；LC3000分析等度高效液相系统（北京创新通恒科技有限公司）；德国美诺G7883实验室清洗消毒机（科德恩（北京）科技发展有限公司）；HX-06超声波清洗器（武汉恒信世纪科技有限公司）；UV-6双光束扫描型紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；TGF-9075A电热恒温鼓风干燥箱（上海?赐伎蒲б瞧饔邢薰?司）；普利赛斯 EP125SM 电子天平（上海天美天平仪器有限公司）。 　　1.2 试药：三乙胺（天津市康科德科技有限公司）、冰乙酸（山东佳泰石油化工有限公司）、乙腈（成都三维化工有限责任公司）、磷酸（济南世纪通达化工有限公司）、盐酸（济南世纪通达化工有限公司）、甲醇（济南世纪通达化工有限公司）、磷酸氢二铵（天津市康科德科技有限公司）、冰醋酸（天津市康科德科技有限公司）。 　　2 含量测定 　　2.1 色谱条件：依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-5]。色谱柱为依利特hypersil BDS C18 色谱柱（4.6*250*5u）；流动相以乙腈为A，水为B，按下表梯度洗脱；检测波长为203nm；流速1.0mL?min-1；柱温：30℃。理论板数按柴胡皂苷d峰计算应不得低于2000。 　　2.2 炮制品的制备 　　2.2.1 醋制。柴胡除去杂质及残茎，洗净，润透，切厚片，干燥，加醋拌匀，焖透，置锅内，用文火炒干，取出，放凉。每公斤柴胡，用醋0.2公斤。 　　2.2.2 鳖血制。柴胡除去杂质及残茎，洗净，润透，切厚片，干燥，置大盆内，淋入用温水少许稀释的鳖血，拌匀，焖润，置锅内用文火微炒，取出，放凉。每公斤柴胡，用活鳖2个取血。 　　2.2.3 酒制。取柴胡除去杂质及残茎，洗净，润透，切厚片，干燥，用黄酒拌匀，焖润手诱，置锅内用文火加热炒干，取出，放凉。每公斤柴胡，用黄酒0.1公斤。 　　2.2.4 炒制。柴胡除去杂质及残茎，洗净，润透，切厚片，干燥，用文火炒至微焦，取出，放凉。 　　2.2.5 制炭。柴胡除去杂质及残茎，洗净，润透，切厚片，干燥，用文火炒至外黑内褐黄色，喷入少量水，取出，晾干。 　　2.2.6 蜜制。柴胡除去杂质及残茎，洗净，润透，切厚片，干燥.取蜜置锅内，加热至沸，倒入柴胡片，用文火炒至深黄，不粘手为度。 　　2.2.7 蜜麸制。柴胡除去杂质及残茎，洗净，润透，切厚片，干燥.将麦麸炒热，加入蜂蜜，炒至不粘手时，加入柴胡片，炒至药材表面显黄色为度，取出，过筛，晾凉。每公斤柴胡，用麦麸0.03公斤，蜂蜜0.01公斤。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取北柴胡适量，粉碎成粗粉，精密称定至容量瓶内，加适量5%浓氨试液的甲醇流动相超声20分钟，放凉，过滤，用甲醇多次冲洗残渣和容器，将冲洗液和滤液合并，水浴蒸干，残渣用50%乙腈溶解并转移至10毫升容量瓶内，用50%乙腈定容，过0.45μm的滤膜，即得。 　　2.4 对照品溶液的制备 　　精密称取柴胡皂苷d对照品约10mg，置5毫升棕色容量瓶中，用流动相超声波振荡溶解并用水稀释至刻度，摇匀，精密吸取1毫升，置10毫升棕色容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含柴胡皂苷d 200μg）。 　　2.5 标准曲线的制备 　　制备浓度为50μg?mL-1、150μg?mL-1、250μg?mL-1、350μg?mL-1、450μg?mL-1、550μg?mL-1、650μg?mL-1、750μg?mL-1、85