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不同因素对蓝莓茎段组织培养影响
不同因素对蓝莓茎段组织培养的影响
摘要:以蓝莓茎段为外植体,研究不同的外值体类型、基本培养基、激素组合对蓝莓启动阶段、增殖阶段、生根阶段产生的影响。结果表明:最容易萌发的外植体类型为幼嫩枝,萌芽率可达853%,增殖培养基以WPM+ ZT10 mg/L+6BA05 mg/L+NAA03 mg/L最佳,生根诱导培养基则以1/2WPM+NAA10 mg/L+活性碳10 g/L为最好,生根率可达95%以上。
关键词:蓝莓 茎段增殖生根
中图分类号:S7939文献标识码:A文章编号:1004-3020(2017)03-0021-03
Abstract: Effects of the combination of explant types, basal medium and hormone on the bourgeoning, proliferation and rooting of blueberry were studied with the stems as the explants. Results showed that the best explants were tender branches on budding, with the budding rate reached 85.3%. Medium of “WPM+ZT1.0mg/L+6BA0.5mg/L+NAA0.3mg/L” was the best on bud proliferation while medium of “1/2WPM+NAA1.0mg/L+ activated carbon 1.0g/L” was the most excellent on rooting, which made the rooting rate above to 95%.
Key words:blueberry stem;segments;proliferation; take root
蓝莓也称笃斯越橘,?俾湟缎」嗄荆?蓝莓果实风味独特,营养丰富[1],其保健包括增强视力、防止眼睛疲劳、防止脑神经老化、抗癌、软化血管、增强人体免疫力等功效,被誉为“世界第三代水果之王”,具有较高的经济价值和广阔的开发前景[2-4]。面对日益扩张的市场需求,以扦插为主的育苗技术显然满足不了市场需求。因此,通过组织培养的方式进行继代增殖,进而短期内获得大量的生根试管苗,满足市场的需求。
1材料与方法
1.1材料
供试材料品种为蓝莓中的“粉蓝”品系,由博白县沙河蓝莓种植基地提供。
1.2方法
1.2.1外植体取材与消毒
选择生长健壮、无病虫害、当年生枝条为试验材料,去除叶片后剪取2~25 cm长带腋芽茎段,用自来水冲洗干净,再用纯净水清洗三遍,随后在超净工作台上灭菌,使用75%的酒精消毒15~20 s左右,再用无菌水清洗三遍,最后用0.1%的升汞溶液浸泡3~10 min[5],(视材料木质化程度而定)无菌水冲洗4~5遍。接种于MS+6BA0.5 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基上。15天后统计无菌材料与萌芽率,试验安排见表1。
1.2.2芽的增殖
以N6、WPM、MS为基本培养基,附加不同浓度的ZT、6BA, NAA,采用正交表(L934)[6]对不同组合处理,3次重复,每处理接种10瓶,每瓶1个茎段,每5天观察一次,20天后记录芽的增殖情况、长势等。试验安排见表2。
1.2.3试管苗生根
以1/2WPM为基本培养基,采用正交表(L934)附加不同浓度的IBA、NAA、AC,三次重复,每处理接种5瓶,每瓶接种10株长约3 cm左右生长健壮的芽条。每10天观察一次,50天后记录苗的生根情况、苗的长势等。
1.3其他培养条件
N6、MS培养基中蔗糖30 g/L,琼脂粉55 g/L,pH60;WPM培养基中蔗糖20 g/L,琼脂粉60g/L,pH55,培养温度均为(25±1)℃, 诱导增殖阶段弱光培养,光强度约800 lx,生根阶段光强度为1 000~1 500 lx (生根初期 1000 lx)。
2结果分析
2.1不同木质化程度的茎段在不同的消毒时间对无菌率及萌芽率的影响
不同的处理结果见表4,由表中结果可知,随着枝条的木质化程度越高,即使消毒时间有所增加,污染率也很高,而萌芽率也是随着苗木木质化程度越高而降低。因此,最佳用来诱导的枝条是幼嫩枝,消毒时间为3 min,萌芽率可达853%。
2.2基本培养基与激素配比对蓝莓芽增殖的影响
由表5可知,不同处理之间的蓝莓芽增殖系数、芽高、及生长状况等相差较大,在不添加有任何激素的培养基里而衡量芽增殖效果最直接
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