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不同氧浓度对体外受精―胚胎移植妊娠结局影响
不同氧浓度对体外受精―胚胎移植妊娠结局的影响
[摘要]目的:探讨体外培养时不同氧浓度对体外受精一胚胎移植(in vitro fertilization-embryotransfer,IVF-ET)中胚胎发育潜能及妊娠结局的影响。方法:将471例于2013年在本生殖中心行IVF-ET的患者,根据其体外培养的氧浓度将其随机分为5%低氧浓度组(n=247)和20%高氧浓度组(n=224)。比较两组间卵子成熟率、受精率、卵裂率、正常受精率、多PN率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用胚胎率、临床妊娠率、着床率及活产率。结果:两组间患者的卵子成熟率、受精率、卵裂率、正常受精率、多PN率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用胚胎率、临床妊娠率、着床率均无统计学差异(P0.05)。但低氧浓度组的活产率显著高于高氧浓度组(48.2%vs.38.4%,P0.05)。结论:低氧浓度胚胎培养能够改善IVF的妊娠结局。
[关键词]氧浓度;体外受精;胚胎移植;活产率
[中图分类号]R697 [文献标志码]A
在生理条件下,胚胎置身于2%~8%的氧浓度中,但目前有不少辅助生殖技术实验室是在大气氧浓度(约20%)下培养胚胎。已经有很多哺乳动物实验证明,在这种超生理浓度的氧分压下培养胚胎会影响胚胎的代谢、发育及相关基因表达。而关于高氧浓度培养对人类胚胎的影响方面的研究仍相当有限,并且结果尚不一致。有些研究显示低氧浓度培养可以提高IVF/ICSI的着床率、妊娠率和活产率,但另一些研究则显示降低氧浓度未能显著提高胚胎的质量、着床率和妊娠率。本研究旨在探讨低氧浓度下培养人类胚胎能否改善IVF的妊娠结局。
1 资料和方法
1.1 研究对象
本研究为前瞻性随机对照研究。选择于2013年1月至12月在本中心行标准长方案IVF-ET治疗的患者进行研究。纳入标准:(1)年龄在20~35岁之间;(2)首次行IVF-ET助孕的患者:(3)基础卵泡刺激素(FSH)2。排除标准:(1)有习惯性流产病史;(2)纵隔子宫、双子宫等子宫畸形;(3)子宫肌瘤、子宫腺肌病等影响宫腔形态的疾病。该研究经本院伦理委员会批准,所有患者均签署知情同意书。符合条件的患者共471例,根据进入治疗周期的顺序按随机数字法分为5%低氧浓度组(研究组)和20%高氧浓度组(对照组)。低氧浓度组置于5%的氧气浓度下,高氧浓度组置于20%的氧气浓度下。
1.2 研究方法
1.2.1 促排卵方案 两组对象均采用标准长方案进行促排卵,于前一月经周期的黄体中期开始注射GnRHa进行降调节。月经来潮后根据降调水平开始以Gn启动,利用B超和血清激素水平检测卵泡发育。当达到取卵标准时,于当晚8时左右注射HCG 10000 IU促进卵泡的最后成熟,34~36 h后在超声引导下经阴道取卵。
1.2.2 胚胎培养及形态学评分 卵子和胚胎培养均采用瑞士Vitrolife公司的G系列序贯培养液。取卵后将研究组的卵母细胞置于氧气浓度为5%的三气培养箱(5%CO2+5%O2+90%N2,Benchtop培养箱,COOK公司,澳大利亚)中培养:而对照组则置于氧气浓度为20%的单气培养箱(5%CO2+空气,Gal-axy S+培养箱,RS Biotech公司,英国,三气培养箱生产批号AC855498,单气培养箱生产批号16895)。取卵后3~4h行常规体外授精,受精18-20h后,观察原核判断受精情况。于受精后第2d、第3d对胚胎进行形态学评分。Ⅰ级:胚胎卵裂球均匀规则,胞质均质透明,透明带完整,胚胎无或仅有极少(50%,碎片外卵裂球具有活细胞特征,胞浆折光性有较大改变,胞浆变黑颗粒不均匀。Ⅰ、Ⅱ级胚胎为优质胚胎。
1.2.3 胚胎移植及妊娠结局判断 于受精后第3d根据患者年龄、周期及胚胎情况选择形态评分最佳的1~3枚胚胎进行移植,剩余胚胎行囊胚培养至第7d,将优质囊胚进行冷冻保存,囊胚培养均在氧气浓度为5%的三气培养箱中进行。移植后14d查血HCG确定生化妊娠,30d行B超检查,见孕囊及胎儿心管搏动确定临床妊娠。
1.2.4 观察指标 记录患者的一般情况(年龄、BMI、不孕年限、获卵数),实验室指标(卵子成熟率、受精率、卵裂率、正常受精率、多PN率、D3优质胚胎率、囊胚形成率、可利用胚胎率)及妊娠结局(临床妊娠率、着床率及活产率)。
1.3 统计学分析
采用SPSS13.O软件包进行统计分析,两样本均数之间的比较采用t检验,率的比较采用x2检验,P0.05说明组间差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 一般情况比较
2013年1月至12月被纳入研究组患者共247例,对照组224例。两组患者之间的平均年龄、BMI、不孕年限、平均获卵数均无显著性差
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