三种拮抗菌生物处理对凤凰水蜜桃保鲜效果的系统研究.docVIP

三种拮抗菌生物处理对凤凰水蜜桃保鲜效果的系统研究 　　摘 要：由于水蜜桃采后极易腐烂变质，延长其贮藏期成为当前的研究热点。鉴于使用化学保鲜剂对环境和人体存在危害，观测和比较了3种病原菌拮抗菌――罗伦隐球酵母（Cryptococcus laurentii），季也蒙假丝酵母（Candida guilliermondii）和丝孢酵母（Trichosporon aquatile）对白花水蜜桃（Prunus persica）采后保鲜品质的影响。试验采取直接喷果的方式，果实处理后装入保鲜袋置于常温条件下（28～30 ℃），24 h后测量其生理指标。结果表明：罗伦隐球酵母保鲜效果最优，季也蒙假丝酵母保鲜效果其次，均好于丝孢酵母保鲜效果。由于这3种酵母菌作为工程菌容易获得，相对安全，因此，对凤凰水蜜桃而言，拮抗菌制剂作为相对有效且无污染的生物保鲜剂，适宜推广应用。 　　关键词：凤凰白花水蜜桃；罗伦隐球酵母；季也蒙假丝酵母；丝孢酵母；生物保鲜剂 　　中图分类号：S662.2 文献标识码：A DOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.04.012 　　水蜜桃以肉质细腻，皮薄多汁，营养丰富深受人们喜爱。‘白花’水蜜桃属于软溶质型桃，收获季节多处于梅雨季节，气温高湿度大，采摘贮运中容易受机械损伤腐烂变质[1]。因此，研究水蜜桃的贮藏保鲜很有必要，关于这方面的研究已有不少报道，主要的保鲜方法有冷藏保鲜[2]、涂膜保鲜[3]、真空处理[4]。而微生物保鲜方法作为生物方法中的翘楚，其效果尤为显著[5]，它主要是利用微生物间的拮抗作用抑制病原菌生长[6]。酵母菌的主要优点是可以在干燥的果树表面生存，利用营养迅速繁殖[7-8]，不产生毒素，受杀菌剂影响小[9]，且具有广谱抗性和较为稳定的防治效果[10]。 　　罗伦隐球酵母 （Cryptococcus laurentii）已被用于控制苹果、梨的青霉病和灰霉病病害，以及草莓、猕猴桃和西柚等水果病害的生物防治中[11]；范青等人研究发现，从桃果实表面分离得到的丝孢酵母（Trichosporon aquatile）能防治苹果灰霉病和青霉病[12]， Roberts[13]认为，丝孢酵母（Trichosporon aquatile）可以在苹果伤口繁殖，抑制黑斑病和坏死病，其悬浮液在25 ℃可抑制苹果灰霉病和青霉病。Roberts[11]认为，由于季也蒙假丝酵母可以利用低浓度营养，同病原菌在伤口处进行营养竞争，可有效抑制油桃和桃果实的采后软腐病[3]。 　　本研究在总结近3年试验数据的基础上，对比不同浓度的3种拮抗菌液对‘白花’水蜜桃的保鲜效果，研究3种菌液在室温（28～30 ℃）条件下，菌液的最优浓度对水蜜桃呼吸强度、失重率、腐烂指数、硬度、可溶性固形物含量、相对电导率、丙二醛含量、PPO酶活性等8种生理指标的影响，选取优势拮抗菌。 　　1 材料和方法 　　1.1 试验材料 　　1.1.1 拮抗菌 从中国农业微生物菌种保藏管理中心（ACCC）购得丝孢酵母（Trichosporon aquatile），季也蒙假丝酵母（Candida guilliermondii）和罗伦隐球酵母（Cryptococcus laurentii）。 　　1.1.2 水蜜桃 试验用采于张家港凤凰镇的‘白花’水蜜桃，色泽相近、大小相似、无损伤无虫害，编号后冷藏待用。 　　1.2 主要仪器 　　无菌操作台、水浴锅、恒温震荡培养箱、电子天平、恒温冷藏冰箱、血球计数板、DDS-11A型电导率仪、VBR-18型手持折光仪、接种环、GY-3型水果硬度仪、显微镜、756MC型紫外-可见分光光度计、TGL1650-WS台式高速离心机、保鲜袋等。 　　1.3 试验方法 　　1.3.1 菌悬液配置 将3种酵母菌活化后，接种于NYDA（葡萄糖10 g，琼脂15 g，营养肉汤8 g，酵母浸膏5 g，水1 000 mL）培养基，28 ℃培养48 h，再取两环于50 mL NYDB（不加琼脂的NYDA）的三角瓶中，28 ℃恒温振荡培养（150 r?min-1）48 h后，制备成以下3种处理液：A）5×108 CFU?mL-1 丝孢酵母培养液；B） 5×108 CFU?mL-1季也蒙假丝酵母培养液；C） 5×108 CFU?mL-1罗伦隐球酵母培养液。并设置对照组：CK）无菌水。 　　1.3.2 试验分组及处理 6个果实一组，均匀喷洒3种拮抗菌液和对照无菌水，通风晾干、套袋，室温中保存，24 h后，每天测量各组果实的各生理指标，每组测量3个重复，整个试验重复2次。 　　1.3.3 测量指标和方法 称重法测定失水率[14]。公式为：腐烂指数=[Σ（级数×对应腐烂果数量）]/该组果实总数[15]，计算腐烂指数。