两种抗凝剂对献血者四项酶联免疫检测结果影响.docVIP

两种抗凝剂对献血者四项酶联免疫检测结果的影响 　　【摘 要】目的：探讨常用的两种抗凝剂（乙二胺四乙酸钠，肝素钠）对血站四项酶联免疫指标（HBsAg， 抗-HCV，TP抗体，HIV抗体检测）采用酶免疫吸附试验（ELISA）时对于检测结果的干扰。方法：随机采集街头无偿献血人群血液标本119份，分别采用EDTA-Na2，肝素钠进行抗凝，然后与其相对应的的非抗凝血（取血清）离心后按照所采用的各试剂盒说明要求进行平行检测。结果：EDTA-Na2和肝素钠抗凝的两组标本在检测 HBsAg时得出S/CO值与血清相比的均有显著性差异（P0.05），而肝素钠与其相比，两者之间有显著性差异（P0.05）；在检测抗-HIV及抗原时，EDTA-Na2抗凝的标本S/CO值与血清相比较，两者差异无统计学意义（P0.05），而肝素钠与其相比两者之间有显著性差异（P0.01）。结论：EDTA-Na2和肝素钠作为抗凝剂，会对血站四项酶联免疫检测结果产生影响。 　　【关键词】抗凝剂；EDTA-Na2；肝素钠；ELISA 　　【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）03-01581-02 　　输血是医学史上一个非常重要的里程碑，但输血这柄双刃剑，一方面，对于危重的患者的救治起到了前所未有的积极作用，挽救了无数生命；而另一方面，它也带来了很多副作用。目前，按照《血站基本标准》及《血站管理办法》，血液采集后需做HBsAg、抗-HCV、HIV（1+2）抗体和（HIV-1p24）抗原、TP抗体 ELISA检测，各项目检测分别采用两个不同厂家试剂，不同的仪器及不同的工作人员进行检测。抗凝剂的性质不同，抗凝原理也不同，抗凝剂作为血液标本的一种添加剂，它的有无和种类不同都可能对检验结果都具有一定影响，研究如下： 　　1 资料与方法 　　1.1样本的留取和制备的方法 　　收集街头无偿献血者样本共 119份，取血辫末端血于EDTA-Na2、肝素钠抗凝管内，来回颠倒5-6次混匀。同时留取非抗凝血，接着将三种血液标本以3000r/min速度离心5min，分离出血浆和血清，而后将三种标本放置4℃过夜。 　　1.2 试剂与仪器 　　乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒、丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒、梅毒螺旋体抗体诊断试剂盒（上海科华生物技术有限公司），人类免疫缺陷病毒抗体（HIV1+2）及抗原（HIV-1p24）联合检测试剂盒（生物梅里埃中国有限公司），均有批批防伪标签并在有效期内。EDTA-Na2 抗凝管（山东永康公司，5ml），肝素钠抗凝管（浙江拱东医用塑料厂，5ml），均有批批防伪标签并在有效期内。离心机（型号：KOBOTA8420），STAR全自动加样器（型号：GienesiRSP200/8）和FAME全自动酶免处理系统（型号：MC-FAME24/30）。 　　1.3 检测方法 全部检测严格按照试剂盒说明书进行微机编程，先由STAR全自动加样器完成样品处理，然后由FAME按照设定的程序完成酶标板的孵育、洗板、加试剂、判读结果以及结果释放等处理过程。 　　1.4 统计学处理 单个项目的两种抗凝管结果分别与血清的检测结果相比较，由于本次实验数据属于非正态分布，所以笔者选用SPSS.v14.0软件的非参数检验方法进行统计。 　　2 结果 　　2.1 两种抗凝剂对HBsAg检测的影响 　　EDTA-Na2抗凝标本与血清两组比较有显著性差异（P 0.01）；肝素钠抗凝标本与血清两组比较有显著性差异（P 0.01），结果见表1。 　　2.3两种抗凝剂对TP抗体检测的影响 　　EDTA-Na2抗凝标本与血清两组比较无差异（P 0.05）；肝素钠抗凝标本与血清两组比较无差异（P 0.05），结果见表3。 　　3 讨论 　　本次采集的119份实验标本，全部来源于街头随机无偿献血者，献血者在献血前要经过健康咨询和HBsAg初筛，本次实验标本的HBsAg、抗-HCV、HIV（1+2）抗体和（HIV-1p24）抗原、TP抗体的检测结果均为阴性。经过统计学的计算，EDTA-Na2和肝素钠抗凝的血液标本与血清相比较差异有统计学意义，但未出现假阳性或假阴性结果。而对于临界值附近的弱反应标本可能出现假阳性或假阴性结果，影响较大。由以上四表可以看出，两组抗凝剂血液标本与血清的检测结果存在着显著差异，说明抗凝剂的种类不同会影响四项酶联免疫检测结果 。EDTA- Na2主要影响HBsAg的检测，肝素钠的主要影响HBsAg、抗-HCV及HIV（1+2）抗体、（HIV-1p24）抗原的检测。 　　从结果可以看出，采用EDTA-Na2抗凝的血液标本总体都要高于血清抗凝的血液标本。原因可能是抗凝剂中的乙二胺四乙酸钠与酶结合物Fe2+的络合的结果，