中药治疗对HIV感染者T细胞表面PD―1和Tim―3表达水平干预研究.docVIP

中药治疗对HIV感染者T细胞表面PD―1和Tim―3表达水平干预的研究 　　摘要：目的探讨中药对HIV感染者T细胞表面PD-1和Tim-3表达水平变化的影响。方法用流式细胞分析术分别检测用中药扶正抗毒丸或康爱保生丸治疗和未治疗的HIV感染者治疗前后T细胞亚群计数和T细胞表面PD-1和Tim-3表达。结果经中药扶正抗毒丸或康爱保生丸治疗的HIV感染者外周血CD4+T细胞计数维持在一定水平，T细胞表面PD-1和Tim-3表达下降，PD-1CD4阳性细胞百分比从044%下降到034%；而未治疗的HIV感染者的CD4+T细胞计数下降，平均下降幅度为55cell/μL，T细胞表面PD-1和Tim-3表达上升，PD-1CD4阳性细胞百分比从031%上升到039%，Tim-3CD8阳性细胞百分比从591%上升到673%。结论中药扶正抗毒丸或康爱保生丸治疗HIV感染，一定时间内可以稳定HIV感染者的CD4+T细胞计数，调节CD4+T、CD8+T细胞表面PD-1和Tim-3表达，对延缓病程起到积极作用。 　　关键词：艾滋病病毒感染；程序性死亡分子1；T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3；扶正抗毒丸；康爱保生丸 　　中图分类号：R51291文献标志码：A文章编号：1007-2349（2016）09-0076-03 　　程序性死亡分子1（Programmed death-1 PD-1）和T细胞免疫球蛋白及黏蛋白结构域分子3（T-cell immunoglobulin domain and mucin domain molecule-3 Tim-3）是近期发现的T细胞表面的共刺激分子，它们分别与各自的配体PD-L和Galectin-9结合并传递抑制性的第二信号[1-2]。研究表明[3-4]HIV感染者的T细胞表面增强表达PD-1和Tim-3，且其变化特征与疾病进展密切相关。中药能调节免疫进而延缓艾滋病病程进展是否与T细胞表面PD-1和Tim-3水平表达有关？为此，笔者分析了中医药治疗和未治疗的HIV感染者治疗前后外周血T细胞亚群计数和T细胞表面PD-1和Tim-3表达变化，现报道如下。 　　1资料和方法 　　11一般资料于2014年3月―2015年11月期间在云南省红河州建水县中医医院和建水县疾控中心诊治的HIV感染者44例。根据其自愿接受中医药治疗是否，分为中药治疗组和自然病程对照组，其中中药治疗组24例，3例为II-B期患者，CD4+T细胞为200-349 cell/μL，21例为II-A期患者，CD4+T细胞为≥350 cell/μL；自然病程对照组20例，4例为II-B期患者，CD4+T细胞为200-349 cell/μL，16例为II-A期患者，CD4+T细胞为≥350 cell/μL；所有HIV感染者临床表现均未出现艾滋病指征性疾病。所有HIV感染者均签定知情同意书，经单位伦理委员会同意。 　　12诊断标准符合《中国艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》[5]中HIV感染者的相关诊断标准。 　　13纳入标准符合HIV感染者相关诊断标准，经蛋白印迹法检查确认HIV抗体为阳性，既往无抗HIV感染的药物治疗史。 　　14治疗方案自然病程对照组：根据患者的意愿，未采取与HIV感染相关治疗，只定期随访。中药治疗组：按照中国中医科学院中医药防治艾滋病研究中心和中华中医药学会艾滋病分会主编的《艾滋病中医药治疗手册》有关规定[6]，对HIV感染者开展免费中医药关怀救治，根据患者病情、症状分别给予口服扶正抗毒丸、康爱保生丸，或两种制剂交替使用治疗，每次3g，每日4次，连续治疗12个月。扶正抗毒丸：滇药制字（Z，处方由黄芪、黄精、白术、女贞子等组成，具有益气养阴，滋肾健脾，清热解毒，每1g丸剂相当原生药44g，成人日用剂量为528g生药。康爱保生丸：滇药制字（Z，处方由紫花地丁、黄芩、桑白皮、人参等组成，具有解毒清热，活血祛湿，养阴益气，每1g丸剂相当原生药35g，成人日用剂量为420g生药。扶正抗毒丸或康爱保生丸均为云南省中医药治疗艾滋病试点项目用药，由云南省中医中药研究院附属医院提供。 　　15观察指标定期随访，观察患者的病情及临床症状体征变化，于治疗前后分别检测患者外周血CD4+T细胞计数、CD8+T细胞计数以及CD4+T、CD8+T细胞表面表达PD-1和Tim-3的阳性细胞百分率。 　　16实验室检查采集EDTA-K2抗凝静脉血，常温下保存和运输，避免极端温度（冷冻或过热），24 h内用美国BD公司FACSCalibur全自动双激光四色流式细胞仪进行检测。采用微量全血法，分别用CD3/CD4/CD8三色荧光抗体、APC-PD-1和APC-Tim-3抗体标记，用CellQuest Pro软件分析