Vc发酵伴生依赖性解除及环境友好生产新技术公示-沈阳农业大学.DOCVIP

项目名称: Vc发酵伴生依赖性解除及环境友好生产新技术 一、提名意见 提名意见： 我单位认真审阅了该项目提名书及附件材料，确认全部材料真实有效，相关内容符合国家科技奖的提名要求。 该项目属于维生素C工业生物发酵领域的技术革新。因对伴生菌有着绝对依赖性，现Vc生产所采用的混菌发酵技术稳定性差、转化率低，成为阻碍生产效率提升的瓶颈。同时，Vc生产排放大量废菌渣液，给企业带来巨大环保压力。针对上述问题，该项目创建了以伴生活性物质替代伴生菌、解除伴生依赖性的Vc单菌发酵新技术；进而再依据山梨糖脱氢酶和古龙酸还原酶的催化特征，建立了双平台控制单菌发酵技术体系。因新技术中伴生菌用量大幅减少，直接削减了废渣液的COD排放量；再利用废菌渣液的等电点和热聚变特性，将其制成饲料蛋白产品，实现了资源化再利用。 新技术已于2014年全面应用于东北制药集团股份有限公司，显著提高了发酵转化率，大幅减少了COD排放。2015~2017三年间，累计新增销售额7.4亿元，新增利润3.5亿元，减排COD 2600吨。项目还获得授权专利9项（其中发明专利7项，实用新型专利2项），完成博士、硕士学位论文28篇，发表国内外学术期刊论文36篇（其中SCI论文5篇）。该项目技术成果获2017年辽宁省科技进步奖一等奖。 对照国家科技进步奖授奖条件，提名该项目为国家科学技术进步奖 二 等奖。 二、项目简介 （限1页） 该项目属于维生素C（Vc）工业生物发酵领域的技术革新。 我国维生素C年产量约为12万吨，占全球总产量的90%，是出口量最大的原料药之一。Vc生产采用二步发酵法，系两种菌（产酸菌和伴生菌）的混合发酵，在发酵中极难同时满足两菌的各自需求，常常顾此失彼而导致混菌关系失衡。这种发酵时的伴生依赖性成为影响发酵稳定运行、阻碍产率提升的最大瓶颈。此外，Vc发酵排放大量废弃菌渣液，年产两万吨Vc的东北制药集团，日排放高COD值（8-10万）菌渣100吨，给企业带来巨大环保压力。 针对上述问题，中国科学院沈阳应用生态研究所联合东北制药集团股份有限公司、沈阳农业大学，在多个国家、省、市科技计划项目的资助下，历时10余年，对Vc混菌发酵机理、伴生活性物质、关键代谢酶、发酵过程调控等方面开展系统深入研究，最终建立了解除伴生依赖性的Vc发酵新技术及其生产工艺，实现了工业化应用。所取得的主要创新性成果有： 研发出简便、廉价的伴生活性制剂制备工艺，首次构建出以伴生活性物质替代伴生菌、解除伴生依赖性的Vc单菌发酵新技术，同时依据山梨糖脱氢酶和古龙酸还原酶之各自特性，建立起双平台控制单菌发酵技术体系，实现了Vc单菌发酵的工业化应用。 单菌Vc发酵新技术使废菌渣中伴生菌大幅减少，直接削减了废菌渣的COD排放量；同时，利用废弃菌渣液的等电点和热聚变特性，将其制成菌体饲料蛋白产品，实现了资源化再利用。 从分子水平上揭示了混菌发酵的伴生规律和作用机理，率先分离并纯化出伴生活性物质，查明其为一个3.6万道尔顿酸性单亚基蛋白质，并系统检测了它的理化特性，为建立解除伴生依赖性的Vc发酵新技术提供了理论基础。 分离并纯化产酸菌的两个关键酶——山梨糖脱氢酶（正向酶）及古龙酸还原酶（反向酶），查明其酶促反应条件及差异，针对性地增强山梨糖脱氢酶活性、减弱古龙酸还原酶活性，形成一套高效酶促催化双平台控制技术体系。 新发酵技术较原混菌发酵技术的古龙酸收率提高了4.3个百分点，发酵周期缩短了17%，同时节省原材料和能耗16.4%，同时，新工艺使废菌渣的COD排放量减少了25%。 项目成果已获授权国家发明专利7项、实用新型专利2项，发表博士学位论文10篇、硕士学位论文18篇、国内外学术期刊论文36篇（其中SCI收录论文5篇）。 项目成果已于2013~2014年间陆续在东北制药集团股份有限公司实现生产应用，2015-2017三年累计新增销售额7.4亿元，新增利润3.5亿元，减排COD 2600吨。 三、客观评价 （限2页。围绕科技创新点的创新性、先进性、应用效果和对行业科技进步的作用，做出客观、真实、准确评价。填写的评价意见要有客观依据，主要包括与国内外相关技术的比较，国家相关部门正式作出的技术检测报告、验收意见、鉴定结论，国内外重要科技奖励，国内外同行在重要学术刊物、学术专著和重要国际学术会议公开发表的学术性评价意见等，可在附件中提供证明材料。非公开资料（如私人信函等）不能作为评价依据。） 查新结论 该成果内容经辽宁省科技情报研究所进行了查新检索。通过分别检索与三个查新点（查新点1：从细胞和分子水平上研究Vc发酵混菌（普通生酮基古龙酸菌、巨大芽孢杆菌）间关系及伴生作用机理，查证、纯化巨大芽孢杆菌的伴生活性物质为3.6万道尔顿且为单亚基的酸性蛋白质；查新点2：创建基于自制伴生活性蛋白制剂的解除产酸菌依赖性的Vc单菌（普通生酮