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荧光偏振分析讲解方法.ppt

* * * * * * * * * * * * Chem. Commun. 2011, 47, 4763-4765. 核酸酶检测及药物筛选 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Biosensors and Bioelectronics, 2013, 41, 569-575. 基于链置换反应开发的纳米金颗粒增强荧光偏振探针 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 J. Mater. Chem. B, 2013, 1, 2018-2021. T4 polynucleotide kinase activity and inhibition §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Chem. Asian J. 2014, 9, 2755-2760. 聚乙烯纳米颗粒增强荧光偏振信号放大分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 金纳米颗粒、硅纳米颗粒等虽然能有效增强荧光偏振值,但是探针与纳米颗粒需要复杂的共价连接; 开发一种普适、简单的荧光偏振增强剂仍然是一个重要的任务。 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 纳米材料的生物功能化方法 非共价功能化途径 静电相互作用 π-π堆积作用 范德华力 碳基纳米材料:石墨烯,碳纳米管,碳纳米颗粒等 ssDNA/dsDNA与碳基纳米材料之间的相互作用差别悬殊 与DNA发生π-π堆积作用 与多肽发生π-π静电作用等 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Chem. Commun. 2013, 49, 1942-1944. 氧化石墨烯增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 “signal-off” “signal-on” Anal. Chem. 2013, 85, 1424-1430. 氧化石墨烯增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Materials Science and Engineering C 2014, 38, 206-211. 碳纳米颗粒增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Biosensors and Bioelectronics, 2014, 54, 285-291. 碳纳米管增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Chem. Asian J. 2014, 9, 87-92. 碳纳米管增强荧光偏振信号分析方法 §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 纳米球形聚电解质刷增强荧光偏振信号分析方法 ChemBioChem 2010, 11, 494-497. §6.2 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 Acta Chim. Sinica 2013, 71, 1620-1624. 二氧化钛纳米棒增强荧光偏振信号分析方法 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 第6章 荧光偏振分析方法 传统荧光偏振技术及发展情况概述 1 纳米增强荧光偏振一般策略及应用 2 如何衡量:偏振值的定义 P = - + 偏振值一般以mP(毫偏)来表示 r = - + 2 对于完全偏振发射,P = r = 1;对于自然光,P = r = 0 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 偏振值的影响参数 偏振值衡量荧光分子的运动性 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 分子的偏振性与分子旋转弛豫时间成比例,分子旋转弛豫时间是分子转过68.5度角时所用的时间; 分子旋转弛豫时间与介质黏度、绝对温度、分子体积和分子重量和气体常数有关。 20世纪50年代Weber进一步拓展了荧光偏振理论并首次将荧光偏振用于生化分析领域。 20世纪80年代,随着荧光探针和荧光偏振分析仪器商业化,荧光偏振技术在生命科学等各个领域扮演越来越重要的角色。 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 §6.1 传统荧光偏振技术及发展情况概述 荧光偏振分析的一般步骤 利用荧光偏振的原理,通过检测荧光素标记的小分子与其它分子相互作用前后分子量的变化,计算水平方向及垂直方向的荧光值作相关分析。 如果被检测分子大,激发时运动慢,测得的荧光偏振光值高。如果分子小,分子旋转或翻转速度快,发射光相对于激发光平面将去偏振化,测得的偏振光值低,从而计算出样品的偏振值(偏振值单位 mP)。 通过专用分析软件,可对检测结果进行分析,判别等工作。 荧光偏振技术比研究蛋白质与核酸结合的传统方法具有更多优势 (特别是不生成有害的放射性废物) 并且检测限更低,可达亚纳摩尔级范围。此外荧光偏振是真正均相的,允许实时检测 (动力学检测),对于浓度变化不敏感,是均相检测形式 (中间不含洗涤步骤 ) 的最佳解决方案。 荧光偏振技

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