时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测乙肝HBsAb浓度中的应用.docVIP

时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)检测乙肝HBsAb浓度中的应用 　　【摘要】目的：调查时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)在乙型肝炎血清学标志物检测中的应用情况。方法：采用芬兰Wallac 1420时间分辨荧光免疫分析仪,试剂为上海新波乙型肝炎定量试剂对本院5890例经过新生儿期的常规乙型肝炎疫苗接种后1至3岁的幼儿（未进行乙型肝炎疫苗加强）血清用TRFIA检测HbsAb，看经过新生儿期的常规乙型肝炎疫苗接种后HbsAb浓度产生的情况。在3岁加强针后检测HbsAb浓度有明显的上升。结果： 1至2岁的幼儿HbsAb浓度产生的情况比2至3岁的要好，1-2岁左右的儿童的HbsAb100mU/ml的占39.5%；2-3岁儿童的HbsAb100mU/ml的占17.8%；3-4岁加强后的儿童HbsAb100mU/ml的占36.6%。也就是说在经过新生儿期的常规乙型肝炎疫苗接种后HbsAb浓度在2岁后有一个较明显的下降，加强一针后HbsAb浓度有明显的上升。结论：时间分辨荧光免疫分析技术检测乙型肝炎HbsAb浓度的高低可作为预防乙型肝炎病毒能力的一种常规方法。也建议幼儿在2岁左右进行一次乙型肝炎HbsAb浓度检测，了解自身的HbsAb浓度以便及时进行疫苗加强。 　　【关键词】时间分辨荧光免疫分析；乙型肝炎病毒 　　【中图分类号】R701.26 【文献标识码】B 【文章编号】1005-0515(2011)10-0248-02 　　 　　乙肝病毒(Hepatits B veiusHBV)感染是我国最常见的感染性疾病之一，而应用免疫技术测定HBV特异性抗原抗体是HBV感染诊断的主要手段。由于免疫学技术的不断发展，抗原抗体检测灵敏度明显提高，使低水平HBV感染得以检出，对临床诊断及流行病学有重要意义［1］ 。 时间分辨荧光免疫分析技术(time resolved fluorecence immunanssay TRFIA)是一个灵敏度高、特异性强的新的免疫检测技术［1］，本文应用这一技术对来我院就诊1至4岁的幼儿进行HbsAb浓度检测，其结果如下： 　　1材料与方法 　　1.1 标本来源: 　　正常幼儿血清：取自我院幼儿体检正常人群5890份。 　　1.2方法和试剂: 　　测试方法：时间分辨免疫荧光分析法(TRFIA)采用芬兰Wallac-1420时间分辨荧光免疫分析仪,试剂为上海新波生物技术有限公司产品。 　　2结果与分析 　　对1至4岁幼儿分三个阶段即1―2岁；2―3岁；3―4岁进行数据统计，结果如下表： 　　 　　 　　(表中数据为不同 HbsAb浓度的人数占有百分数，其中1―2岁共检测2050人次，2―3岁共检测1900人次，3―4岁共检测1940人次) 　　1.2 TRFIAcut off值: 　　TRFIAcut off值的HBsAb浓度≥10mIU/ml时为阳性，HBsAb浓度≥1000mIU/ml为高应答, HBsAb浓度≥100mIU/ml而HBsAb浓度≤1000mIU/ml为中低应答，HBsAb浓度≤100mIU/ml为低定量值，免疫学上为低应答。 　　1.3 乙肝抗原检测: 　　所有的观察对象乙肝表面抗体原（HBsAg）定量检测均为阴性。 　　3 讨论 　　3.1 乙型肝炎是危害儿童身体健康的严重传染病。2006年我国乙肝血清流行病学调查表明，我国人群乙肝表面抗体原（HBsAg）携带者率已从1992年的9.75%降至7.18%，基本上由高流行向中流行区过渡［2］。现在我国为了减少这一疾病的发生率已免费给新生儿注射3针乙型肝炎疫苗（剂量为5μg重组酵母），但通过本次试验检测表明给予新生儿3针剂量为5μg重组酵母乙型肝炎疫苗，对1―2岁的幼儿来说还有15.6%的人群没有产生抗体，并且在2岁后存在一个快速的下降期，2岁后没有进行加强疫苗的幼儿有35.9%的人群没有抗体或在1―2岁时10-20mIU/m的人群下降为HBsAb浓度≤10mIU/ml。是否考虑对新生儿免费的疫苗由5μg重组酵母乙型肝炎疫苗增加到10μg重组酵母乙型肝炎疫苗，以提高新生儿HBsAb产生的人群数，使我国的乙型肝炎由中流行向低流行区过渡。 　　3.2 目前国内检测HBV感染血清学标志物应用较多的仍是ELISA方法。其有以下缺点：1.无法定量；2.灵敏度低；3.由检测原理带来的前带现象无法解决；4.易污染，无法完成HBV感染的动态观察以及低水平HBV感染指标检测。免疫胶体金检测技术可大大缩短检测时间，不需要特殊设备，操作简单，但灵敏度欠佳，假阳性问题难以克服。时间分辨免疫分析技术(TRFIA)是近年发展起来的无环境污染的高灵敏度免疫标记检测技术，因稀土离子本身激发光谱宽荧光发射光谱窄，使这一精密检测技术在普通