miRNA在先天性心脏病中的研究进展.docVIP

miRNA在先天性心脏病中的研究进展 　　摘要：microRNA是一类由约19～25个核苷酸组成的非编码单链RNA，参与着基因转录后的表达调控。目前大量研究表明miRNA在心脏发育方面以及先天性心脏病的发生过程起着重要的作用，成为近年来研究心脏疾病的一个新的热点，也将我们带进一个新的领域。本文就miRNA与先天性心脏病相关性进行阐述。 　　关键词：miRNA；先天性心脏病；心脏发育 　　microRNA（miRNA）是一类由约19～25个核苷酸组成的非编码单链RNA[1]，进化中高度保守，表达时具有严格的时空性和组织特异性[2]，其通过与靶mRNA特异性结合影响mRNA的稳定性，从而抑制mRNA为模板的翻译或者导致mRNA降解，实现对基因转录后的表达调控。人类基因组中约有30%编码蛋白的基因可受miRNA调控，到目前为止，已在动植物和病毒中发现有28645个miRNA分子（Release 21：June 2014）。近年来随着miRNA在心血管方面的深入研究，发现miRNA表达水平的改变参与许多心血管病变发生。 　　1 miRNA的生物特性 　　只有成熟的miRNA才能发挥其作用，而它的成熟需要经过某些酶的加工处理才能完成。在细胞核内，编码miRNA的基因在RNA聚合酶II作用下，形成初级miRNA（pri-miRNA），pri-miRNA继续在Drosha酶和DGCR8以及其他辅因子作用下，产生有60～70个核苷酸长的pre-miRNA（前体miRNA）[3]，pre-miRNA的一个特点为茎环结构，其在转运蛋白Exportin-5的作用下，pre-miRNA从细胞核内被转出到细胞质[4]。随后在Dicer酶作用下，pre-miRNA茎环结构被切割释放出有21～25个核苷酸的miRNA双链，该双链miRNA一条链成为成熟miRNA，而另一条链则被降解。成熟的单链miRNA的随后被加载到RISC（RNA诱导的沉默复合体）[5]，Argonaute蛋白组成RNA诱导的沉默复合体核心元件，促进了miRNA与靶mRNA相互作用，miRNA通过与靶mRNA的3非编码区完全或不完全特异性结合[6]，导致靶mRNA的降解或者抑制以mRNA为模板的翻译，发挥其对基因转录后的表达调控，参与生命活动的各种生理过程，包括胚胎期器官和组织的发育，以及疾病的发生过程。 　　2 miRNA与先天性心脏病 　　先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）是先天性畸形中最常见的一类，系胚胎发育时期由于心脏及大血管的形成障碍或发育异常而引起的解剖结构异常，或出生后应自动关闭的通道未能闭合（在胎儿属正常）的情形，是婴幼儿非感染性疾病中最主要的死亡原因，包括房间隔缺损、室间隔缺损、动脉导管未闭、肺动脉狭窄、主动脉缩窄、法洛氏四联症等。miRNA参与着胚胎时期心脏的发育，它的异常将引起胚胎心脏发育障碍，导致先天性心脏的发生。 　　2.1 miRNA与心脏发育 心脏是哺乳动物胚胎发育过程中第一个开始形成的器官，对胚胎发育和生命的维持起重要作用，与身体其它器官及组织相比，心脏对基因的微小改变更加敏感，在心脏发育途径中尤为重要。目前发现与心脏发育相关的miRNA主要有miR-1及miR-133。Liu等[7]剔除鼠miR-133a-1和miR-133a-2，结果发现缺乏miR-133a-1或miR-133a-2任何一者小鼠心脏是正常发育的，而两者都缺乏的小鼠大约一半死于胚胎期或新生期的心室间隔缺损，能够存活到成年的小鼠则死于扩张型心肌病和心脏衰竭。Zhao等[8]应用Cre同源重组技术，使小鼠心脏组织缺乏加工miRNA的Dicer酶，结果小鼠心脏出现多种发育缺陷，胚胎早期小鼠死亡，由此可知miRNA在心脏发育过程中有着至关重要的作用，为了进一步研究miR-1-2在心脏发育中的作用，又构建了敲除miR-1-2的小鼠模型，发现敲除miR-1-2小鼠易发生室间隔缺损，出生后很快就死亡。研究还发现[9]miR-1通过作用于调节心室心肌细胞伸展的转录因子Hand2，适时阻止Hand2介导的蛋白合成，以调控心脏正常发育。同时Wilson等[10]研究发现miR-499在人ESC心肌特异性分化过程中发挥重要作用。另外miR-208对心脏发育过程中所需的可收缩蛋白β肌动蛋白的重链β-MHC具有调控作用[11]。这些研究结果都表明，miRNA在心脏的发育过程中起重要调控作用，任何一个环节异常都可能导致心脏发育的异常。 　　2.2 miRNA基因及其靶位点的SNPs与先天性心脏病 近年越来越多的研究表明，单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNPs）可改变miRNA对其靶基因的调控过程，导致疾病的发