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化工行业污水对斑马鱼毒性效应研究 　　[摘 要]近年来，中国的水资源越来越紧张。不仅如此，随着中国经济的持续发展，化工行业也越来越发达，带来的化工污染也越来越严重。其中，以水资源的污染最为厉害。水环境安全问题已经成为我国社会经济可持续发展的重要制约因素之一，水污染源 水质监测得到越来越多的关注。通过污染 水体对鱼类产生的毒性效应，可以直接 反映出受纳水体的污染程度，利用小型鱼类 监测水体污染可以补充常规水质监测 的不足。本试验选取了斑马鱼作为实验鱼种，同时选取了5种水样作为收纳水体，这5种水样采集于五处化工厂排污口的污水，分别将其定义为1号化工污、2号化工污水、3号化工污水、4号化工污水、5号化工污水。实验结果表明，1-3的半数致死浓度分别为8.50%、20.80%、22.10%，4无死亡。 　　[关键词]水资源；污染；化工；斑马鱼 　　中图分类号：TV21 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）06-0162-02 　　1 前言 　　水污染是水体因某种物质的介入，而导致其化学、物理、生物或者放射性等方面特征的改变，从而影响水的有效利用，危害人体健康或者破坏生态环境，造成水质恶化的现象。人类的活动使大量的工业、农业和生活废弃物排入水中，使水体受到污染。目前，全世界每年约有4200多亿立方米的污水排入江、河、湖、海，污染了5.5万亿立方米的淡水，这相当于全球径流总量的14%以上。我国本来就是一个缺水国家，而水污染使缺水形势显得更为严峻。七十年代以来，尽管我国在水污染防治方面做了很多工作，但水污染的发展趋势仍未得到有效控制，许多江、河、湖泊、水库的水质仍在下降[6]。 　　2 实验材料与仪器 　　2.1 实验用鱼 　　2.1.1鱼种的选择 　　本次试验用鱼选取了斑马鱼作为试验材料。因为斑马鱼[12]的科属为真骨鱼总目--鲤科，是国际 标准组织推荐的试验用鱼。不仅如此，斑马鱼因其成鱼的个体比其他鱼种偏小，比较便于在实验室饲养，具有繁殖能力强、价格便宜等特点，被广泛应用到胚胎 发育生物学和动物学的基因表达研究、毒物 在生物体内残留累积效应的研究、污染物质 对于鱼类急性毒性研究和生态毒理学 研究。据悉，在全国已经有二十多家大型实验室开始用斑马鱼作为试验用鱼[18]。试验用的斑马鱼主要购于当地水族市场。 　　2.1.2 试验用鱼的驯养 　　本次试验用的斑马鱼驯养参照国际标准《工业污水试验方法---鱼类急性毒性试验》（GB/21814-2008）进行试验[17]，实验开始前将试验用的斑马鱼放置于实验室至少驯养一周，驯养期间需要及时发现和清除受伤、鱼体表刮伤和缺失、鱼身体色变浅或变深、肚皮翻白、行动、反应相对较慢的个体，试验用鱼严格要求死亡率在驯养一周内不得超过鱼总数的10%，如果死亡和生病的鱼量超过了鱼总数的10%，则此批鱼不得使用，需重新购买并驯养一周。 　　国标中指出：在试验前两天停止对鱼的喂养。试验期间，同一批次试验用鱼的选择要挑选体长为2.5～3.5 cm，体重为0.3～0.4g的鱼种，保证单位体积 试验溶液中投放实验生物重量约为1 g鱼/L。有关斑马鱼的详细介绍见表2-1。 　　2.2 仪器与试剂 　　2.2.1 主要仪器 　　溶解氧测定仪，美国，型号：HACH HQ 40 d； 　　分析天平，made by Sartorius，精确称量到0.0001克； 　　pH测定仪； 　　记号笔、烧杯（2L、5L）、量筒（100-1000mL）、容量瓶（1000mL）、温度计、镊子、抄网（细致型、柔软度好）。 　　2.2.2 主要试剂 　　重铬酸钾（AR，天津市科密欧化学试剂开发中心）[18]。 　　2.3 试验用水 　　化工污水急性毒性试验用水 　　本试验所使用的试验用水，完全按照《工业污水试验方法---鱼类急性毒性试验》（GB/21814-2008）[17]所要求的方法进行配制，化工污水所使用的试验用水要使用经过充分曝气的自来水。 　　试验用水条件：DO大于8mg/L，pH为7.8±0.2，硬度为250±25mg/L（以CaCO3 计）[18]。 　　2.4 试验条件 　　化工污水急性毒性条件 　　试验使用鱼大小要接近一致，要使用全身长50mm以下的鱼，要求 最大鱼体的全长与最小鱼体全长的比之为1：1.5。试验 用鱼在正式试验时应在符合下列条件的环境中至少驯养7d。 　　光：每天12～16h光照； 　　温度：与试验鱼种相适宜，温度变化控制在±2℃。 　　水量：每个容器试验用水满足每克鱼用水1L，每个浓度梯度需要相同鱼的数目，可放不少于8尾，预实验可以少于8尾，以满足DO要求即可。 　　溶解氧浓度以氧计的话要保持在4mg/L以上。 　　2.5 试验方法