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动物认知行为学在AD模型中药效评价应用 　　[摘要]动物行为是受中枢神经系统控制的，因此能很好地反映动物脑部的结构功能。阿尔茨海默病（Alzheimer’sDisesse）是一种中枢神经系统变性病，起病隐袭，病程呈慢性进行性，是老年期痴呆症最常见，也是最平常的一种类型。临床主要表现为记忆性障碍、认知性功能障碍、人格改变及语言障碍等神经精神症状，日常生活能力会有减退，并有神经精神症状和行为障碍严重影响社交、职业与生活功能。因此，通过八臂迷宫、旷场等动物认知行为学实验能很好地反映AD研究药物对AD模型动物认知和记忆功能的影响，从而了解AD研究药物的治疗效果。 　　[关键词]AD；八臂迷宫；旷场；物体识别 　　随着人口的老龄化，认知障碍疾病如阿尔兹海默病己成为危害社会人群健康的重大疾病之一。流行病学研究显示，AD的患病率随年龄增高而增高，在65岁以上人群中约为5%，而在85岁以上人群中约为20%。我国目前患有AD的患者大约350～450万，通过大样本流行病学的相关性调查发现我国55岁以上AD的患病率分别为2.59%，65岁以上为4.8%。尽管AD发病的具体诱发机制仍不十分明确，但可以知道B淀粉样蛋白及Tau蛋白异常修饰等在病理过程中起到关键作用，被广泛公认。但是由于国际上对AD病理靶点的研究还不够深入，目前尚缺乏有效的指导思想和治疗药物，因此，寻找更准确有效的指导思想，治疗靶点和相关药物，成为AD治疗研究重中之重。 　　在利用动物样品（小白鼠）来进行实验的阿尔茨海默病的病理病例研究中，主要侧重反映各种记忆能力，例如空间记忆能力的结论测试，测试方法有八臂通道迷宫实验，新物体辨别实验等，目前关于阿尔茨海默病的动物模型实验活动相关研究还比较少，所以我们现在通过旷场实验对AD动物模型的自主行为特点进行了分析。 　　1实验部分 　　1.1实验动物 　　啮齿类动物具有价格低廉、侍养简单、生存率高等特点，并且其与人类的脑部解剖结构和生理特征较为相近和相似，更适于诱导模型测试的大量使用，成为AD最常用的动物测试模型。因此实验室一般选用实验鼠等啮齿类动物。雄性SD大鼠44只，购买于广东省实验动物中心，实验所需体重严格控制在250～300g范围内。 　　1.2八臂迷宫 　　1.2.1实验原理 　　八臂迷宫实验，是目前国内外最为常用，最具有参考价值的评价动物学习记忆能力的模型，是由Olton等人建立。主要作用于检测临床药物在实验动物体内，主要是大脑受损状态下，工作记忆行为和参考记忆行为等方面的表现，它是由若干个完全一样的臂组成的，这些臂从中央向四周围放射出来，每个臂尽头有水和食物提供，实验人员再根据分析动物取食的策略等各种不同参数可以反映出样品动物的对应记忆能力。迷宫操作简单、可行，现已被广泛用于学习记忆认知实验功能评价。 　　1.2.2实验步骤 　　（1）实验动物来到应首先适应新环境，适应新环境7-10天后，定期为其称量体重，禁止进食1-2天，每次训练完结后限制性地提供食料约（15-20g），以使实验动物的体重一直保持在正常进食对照鼠的80%-85%的范围。（2）第二天，工作人员在迷宫的每个臂端及中央区开始分撒食物颗粒（每只5～6粒）。同时将对应数量的实验动物置于迷宫中央（打开通道门）。让实验老鼠自由摄食、探究10min。（3）第三天，重复第二天的训练。目的是为了让实验动物在没有应激条件下反复熟悉环境。（4）第四天起，对实验动物进行单个训练：在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒，让动物自由摄食，并记录数据，食粒吃完或10min后将动物取出。（5）第五天，将食物放在食盒内，将实验鼠进行重复训练，一天2次。（6）第六天以后，随机选若干个（建议先取4个）臂，每个臂放一颗食粒；各臂门关闭，将实验动物放在迷宫中；30s后，臂门打开，让动物在迷宫中自由活动并自行摄取食粒，直到动物吃完所有4个臂的食物。若果10min后，食粒仍未吃完，则实验终止。 　　每天需要来回进行两次训练，每次其间间隔约1h以上。白鼠进入有食物的臂且摄取了食品为一次正确选择，反之则为错误选择。连续训练5次，错误选择次数为1次或1次以下，同时WME必须为零的情况下，断定训练成功。 　　1.2.3注意事项 　　本次试验在操作的过程中主要注意事项是禁止进食，保持重量为原体重81.00%-86.00%，从实验的结果和相关数据显示：实验组与对照组的动物无明显差异性，排除因样品饥饿程度不同与其他非学习因素对实验结果造成的影响。迷宫实验外的一切物品在实验过程中均始终保持不变，目的是使动物进行对照。 　　实验显示，样品大鼠在八臂迷宫内，对于周围光照、人或移动物体以及迷宫内有食物残渣及粪便的情况不了解等因素导致害怕，肾上腺素分泌过多对实验结果有很大的影响，因此实验环境始终需要保持安