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变异蜀葵组织培养研究 　　摘要以花色近于黑色的蜀葵变异植株的蘖芽为材料，进行了芽的生长、分化、试管苗的生根、移栽、扦插和移植的研究，建立起变异植株的无性系。结果表明：MS＋0.2mg/L IAA+0.1mg/L NAA是促进芽伸长生长的理想培养基；1/2MS+0.3mg/L GA＋0.6mg/L BA＋0.1mg/L NAA是芽分化培养的理想培养基；1/2 MS＋1.5mg/L IBA是变异蜀葵试管苗生根培养和生根继代培养的理想培养基；炉灰渣是变异蜀葵试管苗移栽和扦插的理想基质；移植到花坛上的试管苗生长旺盛，保持了花色近于黑色的变异性状。 　　关键词变异蜀葵；组织培养；快速繁殖；无性系 　　中图分类号 S682.1+62 文献标识码A文章编号1007-5739（2008）24-0009-03 　　 　　蜀葵[Althaea rosea（L.）Cavan.]又名淑气花、一丈红、麻杆花、棋盘花等，为锦葵科蜀葵属多年生草本植物[1-3]。蜀葵花色丰富，花大而重瓣性强，园林中常于建筑物前列植或丛植，做花境的背景效果非常好。此外，尚可用于篱边绿化及盆栽观赏[4]。蜀葵花瓣中的色素易溶于酒精及热水中，可用于食品及饮料的着色剂。茎皮纤维可代麻用，全草药用有清热凉血之功效[5-6]。在大连地区，人们把蜀葵的嫩叶直接作为蔬菜食用。 　　在大连的绿化栽培中，人们偶尔发现了1株花色近于黑色的蜀葵变异植株。这株变异植株很难结出种子，即使结出几粒种子，由于分离等因素的影响，其实生苗的后代也不能保持近于黑色的花色。利用分蘖分株的方法进行无性繁殖，每年只能繁殖几株后代，无法满足人们栽培的需要。于是笔者利用茎尖培养的方法，对这株变异植株进行了无性繁殖。虽然目前已有蜀葵组织培养的报道[7-8]，但迄今未见蜀葵变异植株组织培养及无性系建立的报道。 　　 　　1材料与方法 　　 　　1.1材料 　　于5月中旬，把生长较为旺盛的变异植株茎从基部剪掉，同时在根部周围浇透0.01mg/L的BA溶液，以促进分蘖，20d后把根部附近刚刚形成的蘖芽挖出来作为培养材料。 　　1.2方法 　　1.2.1材料灭菌。将具有刚刚萌发蘖芽的变异蜀葵的根采回来后洗净泥土，放到250mL的磨口广口瓶中，用自来水振荡洗涤20min左右，接着用0.05%安利洗涤剂振荡洗涤10min左右，再用自来水洗至泡沫消失。转移到超净工作台，加75%酒精灭菌10～20s，迅速倒入无菌水，洗涤3次，加0.05% HgCl2溶液振荡灭菌1min，再加入等体积无菌水，使HgCl2灭菌液的浓度变为0.025%，继续振荡灭菌14min，接着用无菌水振荡洗涤5次。即获得无菌材料。 　　1.2.2培养条件。以MS、1/2MS为基本培养基，附加不同浓度的BA、IAA、NAA、2，4-D和GA。以MS为基本培养基，加蔗糖30g/L；以1/2MS为基本培养基，加蔗糖15g/L。培养基胨力强度180g/cm2[9]，pH值5.8～6.0。培养温度25～26℃，光照强度2 500Lx，光照时间12h/d。 　　1.2.3不同培养基对蘖芽生长的影响。在超净工作台上，用解剖刀将根上部刚刚开始萌发的蘖芽挖下来，接种到附加0.2mg/L NAA、0.2mg/L IAA和0.2mg/L IAA＋0.1mg/L NAA的MS培养基上。每处理接种外植体10个。在无光照条件下进行无菌芽的生长培养。观察芽的生长情况，40d时统计生长芽数量，计算芽生长率。 　　将培养生长的芽剪成具有1～2个侧芽的茎段，接种到MS＋0.2mg/L IAA +0.1mg/L NAA培养基上，在培养条件不变的情况下进行继代培养。统计每代培养所需时间。连续培养3代，第1代接种20个侧芽，第2代与第3代各接种100个侧芽。观察培养芽的长势。 　　1.2.4不同激素对芽分化培养的影响。将上述培养的芽，剪成具有顶芽或1～2个侧芽的茎段，接种到附加不同浓度的BA（0.0mg/L、0.2mg/L、0.4mg/L、0.6mg/L、0.8mg/L和1.0 mg/L）、IAA（0.0mg/L、0.1mg/L和0.5mg/L）和NAA（0.0mg/L、0.1 mg/L和0.5mg/L）的1/2MS+0.3mg/L GA培养基上。每处理接种外植体50个。重复5次。在光照条件下进行芽分化培养。观察芽的分化情况，40d时统计分化芽数量，计算分化率。 　　把分化丛生芽剪成具有顶芽或1～2个腋芽的茎段，接种到相同的培养基上进行分化继代培养。连续继代培养8代，观察分化芽的分化率、单芽分化数和长势。每次试验接种100个材料，试验重复3次。 　　1.2.5不同培养基对生根的影响。将上述分化培养的丛生芽剪成具有顶芽或1～2个腋芽、高1.5cm左右的茎段，接种到附加不同浓度