半夏组织培养与快繁试验.docVIP

半夏组织培养与快繁试验 　　摘 要:以传统中药半夏的小块茎为外植体进行组织培养,对适合不定芽分化增殖、生根的培养基进行了研究。结果表明,利于愈伤组织诱导的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.2 mg/L,利于不定芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+ NAA 0.5 mg/L,利于生根的培养基为MS+ NAA 0.5 mg/L。试验表明,应用本项组织培养技术大批量生产优质半夏种苗是可行的。 　　关键词:半夏;不定芽诱导;增殖;组织培养;快速繁殖 　　中图分类号:S567.25??+9.043文献标识号:A文章编号:1001-4942(2010)01-0010-02Tissue Culture and Rapid Propagation of Pinellia ternata 　　 　　 YANG Yu-zhen??1, WANG Xi-yu??2 , HU Ru-shan??1, SUN Ting??1 　　(1. Center of Plant Tissue Culture, Nanyang Agricultural School, Nanyang 473003, China;??2. Nanyang Garden Bureau, Nanyang 473003, China) 　　Abstract The small tubers from Pinellia ternata were used as explants for tissue culture.The culture media for multiplication of adventitious bud and rooting were studied in this paper. The results indicated that the suitable culture medium for inducing calli was MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L, while that for multiplication of adventitious bud was MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,for rooting was MS + NAA 0.5 mg/L. And it was practicable to produce a large number of high quality Pinellia ternata plantlets by this tissue culture technique. 　　Key words Pinellia ternata; Adventitious bud induction; Multiplication; Tissue culture; Rapid propagation 　　半夏(Pinellia ternata)是一味常用中药,属天南星科半夏属,以块茎入药。传统中药是以野生半夏为原料,既破坏了野生植物资源,又满足不了药材供应。人工栽培繁殖力低, 生产周期长,常规育种和育苗无法提供足够的种苗。应用现代生物学手段对其进行组织培养,建立半夏无性系快速繁殖体系,可以提高其繁殖系数,而且不受地区、季节与气候限制,便于工厂化生产。 　　1 材料与方法?ナ匝椴牧衔?当地野生半夏。选取健壮半夏的块茎,用清水冲洗干净,75%酒精浸15 s,0.1%升汞消毒15 min,然后用无菌水冲洗4～5次,在无菌条件下把半夏块茎纵切为直径1 cm切块,分别接种在不同培养基上。置于2 000 lx光照下,培养25～30 d。?? 　　当愈伤组织膨大,出现有绿色小芽点时,转移到不定芽分化培养基上,每个配方接种20瓶,培养一段时间后,将丛生芽分离接种于筛选出的适合芽分化的培养基上,继续进行继代增殖。?? 　　当丛生芽长到5 cm左右时自底部切下,接种于生根培养基上进行生根培养,每个生根配方接种20瓶,30 d后进行观察。 　　培养条件:基本培养基为MS,每种培养基均加入蔗糖3%,琼脂0.6%,pH 5.6～5.8,培养温度24℃。 　　2 结果与分析 　　2.1 生长与分化情况?? 　　将消毒处理后的块茎小切块接种于诱导培养基上,不同激素配比下的诱导情况见表1。?? 　　表1结果表明,配方(4)生长较好,外植体周围有较多颗粒状愈伤组织,易分散。接种于培养基(2)上的茎尖,愈伤组织过大,过于疏松; 接种于培养基(6)上的外植体形成愈伤组织很小,过于致密。 　　表1 不同激素配比对诱导形成愈伤组织的影响 　　培养基?け嗪偶に嘏浔?6-BANAA诱导愈伤组织情况(第30 天观察) 　　(1)??(2)0