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华肖菝葜组织培养技术初步研究 　　摘 要：为了更好地开发利用华肖菝葜，该研究以华肖菝葜幼嫩带芽茎段为外植体，以MS为基本培养基，研究了不同植物激素组合对华肖菝葜组织培养的影响。试验结果表明：外植体的最佳消毒方式为20%次氯酸钠消毒20min，最佳启动培养基为MS+6-BA6.0mg/L+NAA0.15mg/L+活性炭1 000mg/L，在启动培养基上培养25d左右诱导率达到76%。 　　关键词：华肖菝葜；组织培养；植物激素；外植体 　　中图分类号 R282.71 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2016）16-0027-03 　　Abstract：The aim of the research was to develop and utilize Heterosmilax chinensis Wang better. Taking the young stem of Heterosmilax chinensis Wang as the explant，using the MS as the basic culture medium，the effects of hormone combination on callus formation and plantlet regeneration of Heterosmilax chinensis Wang were studied in this paper. The results indicated that：The optimum disinfection method of explatrts was disinfecting with 20% sodium hypochlorite for 20 min.The optimum initial medium was MS+6-BA 6.0mg/L+NAA 0.15mg/L+activated carbon 1 000mg/L，with the induction rate being reach 76%，when cultivated in initial medium for 25d. 　　Key words：Heterosmilax chinensis Wang；Tissue culture；Plant hormone；Explant 　　华肖菝葜为百合科华肖菝葜（Heterosmilax chinensis Wang）或短柱肖菝葜（Heterosmilax yunnanensis Gagneb）的攀援灌木，主要产地为四川中部至东南部、云南东南部、广西西南部和广东北部。生于海拔300～2 100m的山谷密林中或灌丛下[1]。白土苓为华肖菝葜或短柱肖菝葜的干燥块茎，收载于《中华本草》，其味甘、淡，性平，具有清热利湿、解毒消肿等作用，用于小便淋湿、白浊、带下、痈肿消毒等症[2]。白土苓用药历史长，与中国药典收载的土茯苓不仅药名相近，而且历代本草常以同药名土茯苓记载。《本草纲目》[3]一谓“土茯苓有赤白2种，入药用白者良”，所称白者为白土茯苓，赤者为土茯苓。在我国很多地区常把白土茯苓作土茯苓使用，混用历史较悠长，市场上药材品种混乱，真伪难辨别[4]。最新研究表明，华肖菝葜提取物中含有β-谷甾醇、棕榈酸和硬脂酸[5-6]，在利尿、抗炎、抑菌、解毒、肿瘤抑制等方面具有显著作用[7]。 　　华肖菝葜入药部位根的生长年限较长，资源更新较慢。近年来，这一野生资源由于人们的过度挖掘，日益减少，加之其花序小，单性异株，种子难于采收[8-9]。华肖菝葜的繁殖主要依靠自然分蘖或实生繁殖，但分蘖能力及种子发芽率低，扦插或嫁接较难成活[10]。为了更好地开发利用保护这一野生资源，笔者对华肖菝葜的组织培养技术进行了初步研究。采用组织培养，可以快速获得大量无菌苗，对保护这一野生资源具有重要意义。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 试验用的华肖菝葜外植体取自上午09：00―11：00当年萌生的健壮带芽茎段。试剂：蔗糖、琼脂、酒精、次氯酸钠、6-BA、NAA、HCl、活性炭，以上试剂均为分析纯。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 培养基配制 以MS培养基为基本培养基，根据实验需要添加其他物质（6-BA、NAA、活性炭等），定容至1 000mL，用1mol/LNaOH调节培养基pH至5.8。最后培养基中加9g的琼脂和30g蔗糖，在121℃高压灭菌20min，备用。在配制母液时，把Ca2+与SO42-、Ca2+与PO43-放在不同的母液中，以免发生沉淀。各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。在使用提前配制的母液时，应在量取各种母液之前，轻轻摇动盛放母液