网站大量收购闲置独家精品文档,联系QQ:2885784924

2012年高考生物专题复习——PCR技术幻灯片.pptVIP

2012年高考生物专题复习——PCR技术幻灯片.ppt

  1. 1、本文档共25页,可阅读全部内容。
  2. 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
  3. 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  4. 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  5. 5、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  6. 6、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  7. 7、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  8. 8、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
* 核技术: 能量的放大 计算机芯片: 信息的集成 20世纪自然科学的两大成就 PCR技术: 生命信息的放大 基因芯片: 生命信息的集成 20世纪生命科学的两大成就 PCR技术 朱晨兵 高考专题复习 多聚酶链式反应(Polymerase Chain Reaction),是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。 1988年美国穆里斯(K.Mullis)等人发明,荣获1993年诺贝尔化学奖。 PCR 【基础知识】 一、PCR原理: DNA复制: 半保留复制; 【基础知识】 一、PCR原理: DNA复制: 半保留复制; 需要提供合成模板; 不能起始新的DNA链,必须要有引物提供3’-OH; 合成的方向都是5’→3’。 DNA聚合酶 【基础知识】 一、PCR原理: DNA复制: 半保留复制; DNA的热变性原理。 Taq DNA聚合酶 耐高温。 【基础知识】 二、PCR条件: 胞内DNA复制与PCR技术的比较: Mg2+,缓冲对 缓冲液 DNA母链 模板 半不连续复制 子链合成 最适温度 温度 dNTP 能量+原料 RNA 引物 解旋酶/DNA聚合酶/DNA连接酶/引物酶 酶 解旋酶,边解旋边复制 解旋 PCR 胞内DNA复制 变性 Taq DNA聚合酶 DNA母链 dNTP 3个温度 Mg2+,缓冲对 连续复制 DNA 【基础知识】 二、PCR条件: 引物: 利用软件设计。 引物设计的原则: 决定PCR扩增产物的特异性和长度。 1.引物长度: 通常为20~30bp,尽量降低引物与非扩增区的同源性; 2.引物内部不能存在部分互补序列; 3.两个引物之间不能存在部分互补序列; 4.引物的5’端可以修饰,但3’端不可以修饰: 如探针标记。 例题 1 【2011年安徽】家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。 采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水、4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、 和 。 对干扰素基因特异的DNA引物对 Taq DNA聚合酶 例题 2 【2011年江苏】请回答基因工程方面的有关问题: (1)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如下图),请分别说明理由。 ①第一组: ; ②第二组: 。 引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效 引物Ⅰ’自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效 (2)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为 。 DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上 【基础知识】 二、PCR条件: 温度: 70℃~75℃: 90℃~95℃: 55℃~60℃: 变性; 复性; 延伸。 【注意】 具体温度与DNA母链及引物中的G、C含量有关。 例题 3 【2008年江苏】回答下列问题。 (1)在采用常规PCR方法扩增目的基因的过程中,使用的DNA聚合酶不同于一般生物体内的DNA聚合酶,其最主要的特点是 。 (2)PCR过程中退火(复性)温度必须根据引物的碱基数量和种类来设定。表1为根据模板设计的两对引物序列,图2为引物对与模板结合示意图。请判断哪一对引物可采用较高的退火温度? 。 耐高温 引物对B 【基础知识】 三、PCR过程: 预变性; 复性; 延伸; 循环。 变性; 【2011年江苏】利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如下图所示)。图中引物中为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。 (1)从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占比例为 。 (2)在第 轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 15/16 三 例题 4 【拓展视野】 人教版选修3“利用PCR技术扩增目的基因的前提,是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。”,怎样理解? 基因工程的第四步“目的基因检测与鉴定”中的基因探针如何获取? 【2011年北京】根据

文档评论(0)

mkt361 + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档