哮喘患者痰中IL5和IL13表达检测及临床意义.docVIP

哮喘患者痰中IL5和IL13表达检测及临床意义 　　[摘要] 目的 观察支气管哮喘患者痰液中IL-5和IL-13水平,了解支气管哮喘患者的免疫学特征。方法 检测哮喘者和正常对照者痰液中IL-5和IL-13含量,对两组痰液中的细胞因子进行比较分析。结果 哮喘组痰液IL-5和IL-13水平较正常对照组明显增高(P0.01)。结论 IL-5和IL-13参与了哮喘的发病,其水平对于支气管哮喘急性发作诊断治疗有重要意义,检测其水平可作为临床诊断哮喘、评价哮喘严重程度及疗效的指标。 　　[关键词] 支气管哮喘患者;白细胞介素5;白细胞介素13 　　[中图分类号] R562.2 [文献标识码] A[文章编号] 1673-9701(2010)02-12-02 　　 　　支气管哮喘(哮喘)是呼吸系统的常见病和多发病。许多细胞和细胞分泌成分在哮喘的发病过程中起到重要作用,其中T细胞、嗜酸性粒细胞在哮喘气道的慢性炎症中起一定的作用[1]。作为细胞间信息传递的信使,近年来白细胞介素已经愈来愈得到人们的重视,新的细胞因子不断被发现,其中许多新发现的白细胞介素与变态反应性疾病的关系密切,特别是由Th2型CD4+T细胞亚组(Th2细胞)产生的细胞因子,不仅对过敏性炎症,而且对IgE免疫应答上也起重要作用[2]。为了进一步探讨Th2类细胞因子在重症哮喘急性发作期的炎症反应中的作用,分别观察哮喘患者痰液中IL-5和IL-13水平,本文对此两个炎性相关因子进行相关性分析,以了解Th2类细胞因子在重症哮喘急性发作期患者炎症反应中的作用。 　　 　　1对象与方法 　　 　　1.1研究对象 　　支气管哮喘患者组:本组病人包括了2007年9月～2008年5月收治的的支气管哮喘病人18例,其中男性12例,女性6例。年龄19～48岁,平均33岁。支气管哮喘病史1～21年不等,平均9年。均符合2003年《支气管哮喘防治指南》哮喘诊断标准[3]。本实验观察前患者均未使用肾上腺皮质激素和其他免疫调节剂。正常对照组l6例均为正常健康体检者,其中男性10例,女性6例。年龄26～51岁,平均35岁。所有患者未合并心、脑血管疾病,且近期无感染史、胸片正常,无个人及家族过敏性疾病。两组观察对象间年龄、性别等无显著性差异。所有研究对象均获知情同意。 　　1.2实验方法 　　1.2.1痰液诱导和处理 (1)使用峰流速仪测基础峰流速(PEF);(2)吸入200μg沙丁胺醇;(3)10min后再测PEF;(4)雾化吸入已消毒的高渗盐水,浓度从3%渐增至5%,雾量调整为1mL/min,吸入时间控制在20min内;(5)视患者病情严重程度不同,可以每5分钟测PEF,或在开始的第1、4、5分钟测PEF,其后再每5分钟测PEF;(6)雾化吸入期间患者出现不适或测得PEF降低值大于20%吸入沙丁胺醇后测得的PEF值时,立即暂停试验;(7)鼓励患者于雾化吸入开始后第5、10、15、20分钟用力咳出深部的痰,或欲咳痰时咳痰;(8)若为高危患者,先雾化吸入0.9%盐水5min,在第30秒、第1,5分钟监测PEF,若未诱导出痰则改为吸入3%盐水2min,在第30秒、第1,2分钟分别测PEF,若仍未诱导出痰则吸入4.5%盐水8min,在第30秒、第1、2、4、8分钟监测PEF,鼓励患者在第4、8分钟咳痰。将所收集痰液称重后加入等量的0.1%二硫苏糖醇(DTT)进行黏液溶解,用吸管反复吹打,漩涡器振荡15s,22℃或37℃恒温振荡器中振荡10～30min,48μm尼龙网过滤,离心1000r/min,5～10min,留取上清液,-70℃冻存,待测。 　　1.2.2液相IL-5、IL-13水平检测均采用多抗体夹心ELISA方法测定,IL-5检测所用试剂盒来自北京邦定生物技术有限公司。IL-13检测所用试剂盒来自深圳晶美生物工程有限公司。 　　1.3统计学分析 　　采用SPSS12.0统计软件,实验组与对照组IL-5值和IL-13值以均数±标准差表示,并采用t检验。 　　 　　2结果 　　 　　哮喘组痰液IL-5水平为[(57.28±12.34)pg/mL]较正常对照组痰液IL-5水平[(17.54±6.76)pg/mL]明显增高(P0.01)。哮喘组痰液IL-13水平[(19.66±3.48)kU/L]较正常对照组[(8.34±4.37)kU/L)明显增高(P0.01)。见表1。 　　 　　3讨论 　　 　　支气管哮喘(哮喘)是一种常见病、多发病,已成为全球性的社会卫生问题,对人类的健康构成了严重威胁。多 　　年来大量研究提出的众多学说分别从不同的角度揭示了哮喘的发病机制,20世纪80年代建立的气道炎症学说现已被广泛接受,但该学说仍不能完全解释哮喘的发病机制。近年不少学者研