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土壤铅胁迫对核桃幼苗生长影响 　　摘要：采用盆栽实验，设置不同铅污染浓度的土壤作为培养基质（100、500、1000、1500、2000mg?kg-1），研究了铅胁迫对核桃1年生幼苗生长过程中叶片叶绿素含量、可溶性糖含量等生理指标及株高、地径等生长指标的影响。结果表明：随着Pb2+浓度的升高，核桃幼苗叶片中可溶性糖含量呈下降趋势；较低浓度的Pb2+总体上有助于核桃幼苗叶绿素含量、株高、地径的增长，而过高浓度的Pb2+胁迫，直接抑制核桃幼苗的生长。 　　关键词：核桃；叶绿素；株高；地径；可溶性糖 　　中图分类号：S664.1文献标识码：B文章编号2015 　　1引言 　　随着工业化和城市化的发展，铅污染问题日益严重，环境中重金属的积累不断加剧，其中有相当部分进入土壤，使土壤遭致污染，破坏了生态系统的正常功能。铅是植物生长非必需的有毒元素，在土壤中过多积累会对植物的生长造成一定的胁迫 ， 最终影响植物的生长与发育1。并且人类也会通过食物链的关系，食用这些植物，危害人类健康2。 　　近年来，由于人们对环境问题的重视，有关铅对植物生理效应及其生物学性状的研究很多，并取得了较大的成果，但是大多集中在对草本及农作物生长的研究，对木本植物的研究较少3。因此本研究项目主要以核桃树为研究材料。核桃树（Juglans regia），属胡桃科胡桃属的落叶乔木。果实的营养丰富，每百克含蛋白质15～20g，脂肪60～70g，碳水化合物10g，并含有人体必需的钙、磷、铁等多种微量元素和矿物质，以及胡萝卜素、核黄素等多种维生素，据测定，500g核桃仁相当于2500g鸡蛋或4750g牛奶的营养价值，特别是对大脑神经细胞有益的钙、铁和维生素B1、维生素B2等成分含量比较高4，5。 　　而核桃作为毕节市多年发展山区经济实践中筛选出来的一个主要特色经果林树种，在毕节市农村产业结构调整中，核桃产业得到快速发展，目前已作为支柱产业进行大力发展，做大做强核桃产业有利于调整山区产业结构、发展庭院经济、增加农民收入、保护生态环境、绿化美化村庄、改变山区贫困面貌6，7。毕节市的赫章、威宁等县区由于土法炼锌等落后的生产工艺导致目前仍有大量的铅锌矿山迹地，研究铅胁迫对核桃幼苗生长过程中苗高、地径等生长指标及叶绿素含量、可溶性还原糖的含量等生理活性指标的影响，有助于进一步揭示核桃树生长过程中对重金属的富集机理，为探索经果林树种在矿山迹地植被恢复中的利用及核桃的规范化种植提供理论依据，从而加快毕节市核桃产业的发展。 　　2材料与方法 　　2.1供试苗木的选择 　　本实验供试的核桃幼苗为毕节市林业种苗站提供的一年生核桃实生苗。 　　2.2铅胁迫处理 　　选用30cm（直径）×30cm（高）的花盆为试验盆，无污染过筛后充分混匀的土壤土作为盆栽基质，每盆装土9kg（干重），盆下垫托盘，将供试核桃树幼苗除去根系原土后进行盆栽移植，每盆栽植1株幼苗。移植后将试验盆放于正常通风、光照的地方，并进行常规浇水管理，待苗木恢复生长2个月后，选取个体健康状况一致的苗木进行铅胁迫处理。铅胁迫处理时以Pb（CH3COO）2?5H2O水溶液的形式加入到基质中，制成铅含量为（以1kg风干基质中含纯铅毫克数计）100、500、1000、1500、2000mg?kg-1的污染土壤，另设不添加污染物的基质作为对照，每个处理浓度设置3个重复。所有的处理及处理后的苗木都在简易大棚内进行培育，且每次用等量的水浇灌进行养护，从而避免因受雨水或浇灌水的影响而造成植株间处理浓度的差异，处理90d后分别取样测定叶绿素含量、可溶性总糖、每棵植株的株高与地径。 　　2.3核桃幼苗生理指标测定 　　2.3.1叶绿素含量的测定 　　采用叶绿素测定仪直接测定。 　　2.3.2可溶性总糖的测定 　　（1）可溶性糖的提取。取核桃叶片于80℃烘干至恒重并磨碎，称取50mg磨碎后的核桃叶片倒入10mL刻度离心管内加入4mL80%乙醇，置于80℃水浴中不断搅拌40min后，离心，收集上清液，其残渣加2mL80%乙醇重复提取2次，合并上清液，在上清液中加10mg活性炭，在80℃水浴中脱色30min再用80%乙醇定容至10mL，过滤后取滤液测定8。 　　（2）标准曲线制作。取7支20mL干燥洁净的带塞试管，然后在每只试管中加入5mL蒽酮试剂，混匀，盖上塞子，在沸水中煮沸10min，取出试管，立即用水冷却至室温，在625nm波长下，分别测量出各管的OD值，用0号管调零，以OD值为纵坐标，葡萄糖含量为横坐标，绘制标准曲线，求出标准方程式。 　　（3）样品含糖量的测定。吸取上述提取液1mL置于试管中，加入5mL蒽酮试剂，用上述同样的方法，以0号管调零，在625nm处测出OD值，由标准