土壤无机磷酸盐中氧同位素分析方法研究及应用.docVIP

土壤无机磷酸盐中氧同位素分析方法研究及应用 　　摘 要 土壤磷酸盐氧同位素在生物地球化学研究领域中具有重要的应用，土壤成分复杂，氧同位素来源多样，可靠的样品富集和纯化技术是磷酸盐氧同位素研究的前提保障。本研究以土壤无机磷酸盐氧同位素为研究对象，采用多步沉淀法对土壤中无机磷酸盐进行提取，并转化成Ag3PO4沉淀分离，用于磷酸盐氧同位素测试。以氨水重结晶方法对Ag3PO4进行纯化，通过XRD和元素分析验证了产品纯度。结果表明，通过H2O2漂洗去除有机质后，辅助氨水重结晶可有效去除Ag3PO4中夹杂的Ag2O和Ag单质等无机杂质，未产生同位素分馏， 采用标准KH2PO4对方法全流程安全性进行验证。对3种不同利用类型的土壤中磷酸盐进行分析，结果表明，方法的平行性良好，不同类型土壤磷酸盐氧同位素差异显著，δ18Op值在15.2‰～19.5‰之间，可用于土壤磷溯源研究。 　　关键词 土壤； 无机磷酸盐； 磷酸银； 氧同位素 　　1 引 言 　　磷酸盐氧同位素组成的研究为认识磷源的贡献，示踪磷酸盐生物化学循环途径、反应微生物或酶反应活性、磷酸盐所处周边环境温度变化，以及海洋生态系统磷循环研究发挥了重要作用。近年来，土壤中磷酸盐氧同位素在生物地球化学研究中备受关注。在地表自然条件下，单纯无机过程对磷酸盐氧同位素没有影响，而生物或酶作用却可使磷酸盐与周边环境中的氧发生交换，使磷酸盐中δ18Op发生变化。磷酸盐氧同位素组成的变化一定程度反应了土壤生态系统的活动性。由于不同的土壤磷源具有不同的反应活力，其给予植物和土壤微生物的养分的能力不同，磷酸盐氧同位素与微生物的关联使人们有可能阐明有机磷源和无机磷源在土壤中对植物及微生物的作用过程，以及在不同动植物物种之间的差异。因此磷酸盐氧同位素有望成为土壤生态系统磷循环研究的重要途径和手段，以及新型研究土壤磷生物化学反应过程的有力工具。 　　目前，土壤中δ18Op的报道仍十分有限，土壤中含有丰富的有机质和其它复杂底质，氧元素的多种来源使得土壤中磷元素的提取过程异常复杂，不仅要避免处理过程中激烈酸碱条件或高温带来焦磷酸盐或有机磷酸盐水解或氧交换产生的氧同位素偏移，更需彻底去除磷酸盐沉淀过程其它氧元素附着的干扰。可靠的样品富集和纯化技术是磷酸盐氧同位素研究的前提保障，也是目前土壤磷酸盐氧同位素研究的重点和难点。文献开展了系列土壤磷酸盐的富集、纯化方法的研究。Tamburini等介绍了提取以HCl可溶解的土壤磷酸盐方法，先后采用磷酸钼胺和磷酸铵镁使磷酸盐在相对温和的条件下通过多次沉淀与其它杂质分离，并最终转化为Ag3PO4进行测试；Weiner等介绍了提取土壤表面易被植物吸收的无机磷源的方法，以阳离子交换树脂和土壤在去离子水中振荡吸附磷酸盐，用酸将磷酸盐从膜中洗脱，转为CePO4沉淀，再通过阳离子树脂去除Ce3+，并转为Ag3PO4沉淀；而Zohar等则先后以H2O、弱碱NaHCO3、强碱NaOH和强酸HCl对土壤中磷酸盐逐级进行提取，并将每步提取的磷酸盐分别沉淀为Ag3PO4单独测试，发现不同形态的磷酸盐氧同位素存在差异。 　　由于土壤中的无机磷一般占土壤全磷的50%～80%，本研究选择土壤无机磷酸盐作为研究对象，选取了不同利用类型的土壤，采用多步沉淀法对土壤中无机磷酸盐进行提取，并探讨了Ag3PO4的纯化方法、纯化效果及方法对同位素分馏影响，为土壤中无机磷酸盐的氧同位素研究奠定基础。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器、试剂与材料 　　Sterifil卫生过滤系统（Millipore公司）；CR22GII高速离心机、Universal 320R低速离心机（Hettich公司）；ZHWY-211B摇床（上海智诚公司）；X′Pert PRO X射线衍射仪、AxiosmAX X射线荧光光谱仪（PANalytical公司）；Delta V advantage元素分析仪-稳定同位素质谱仪（Thermo Fisher公司）。 　　DAX-8树脂（40～60目，Sigma-Aldrich公司）；AG 50W-X8树脂（H+型，100～200目，BioRad公司）； Millipore 聚碳酸酯滤膜（0.22 μm）；钼酸铵、NH4NO3、柠檬酸、氨水、MgCl2（分析纯，上海国药集团）； AgNO3（分析纯，上海申博化工），Ag3PO4（99%，Alfa Aesar公司）。 　　土壤样品自然晾干，过200目分子筛后备用。 　　2.2 实验方法 　　2.2.1 土壤中PO3-4的提取和富集方法 （1）提取无机磷酸盐 称取30 g土壤于聚丙烯瓶，向其中加入120 mL新配1 mol/L HCl，室温摇荡过夜。离心，收集褐色滤液A。（2）去除有机质 向溶液A中加入25 mL DAX-8树脂浆，摇床振荡