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地黄寡糖在2型糖尿病动物模型降血糖作用及初步机制 　　摘要：目的 研究地黄寡糖（ROS）在2型糖尿病动物模型上对血糖、血脂水平的影响；研究地黄寡糖对2型糖尿病动物肝脏糖代谢酶活性及血脂的影响。方法 采用长期高脂肪饲料饲养加小剂量链脲佐菌素（STZ 30mg?kg-1，ip）诱导大鼠2型糖尿病动物模型。动物分为正常对照组、2型糖尿病模型组、ROS给药组及阳性对照组，给药组根据情况分为高（200 mg?kg-1）、低（100 mg?kg-1）剂量组。动物为雌性大鼠，每组8～10只左右。均为灌胃给药。阳性对照选用二甲双胍。结果 地黄寡糖（ROS）高剂量组的血糖值、血脂、葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）活性均较2型糖尿病模型组低，而肝糖原的含量较阳性糖尿病模型组高。结论 地黄寡糖灌胃能有效降低2型糖尿病大鼠的血糖和血脂水平，其机制与增加大鼠肝糖原合成、降低肝葡萄糖-6-磷酸酶的活性有关。 　　关键词：地黄寡糖；链尿佐菌素；2型糖尿病；降血糖 　　糖尿病（diabetes mellitus， DM）是由遗传和环境因素共同作用引起的、以高血糖为主要标志的代谢综合征，是一种常见的、多发的慢性病， 中医学属于消渴症范畴。糖尿病与癌症、心血管疾病并称为世界三大疾病， 至今尚缺可以根治的药物。临床上通常分为1型糖尿病（Type 1 diabetes）与2型糖尿病（Type 2 diabetes）。2型糖尿病是因β-胰岛素细胞功能障碍或因胰岛素抵抗（IR）而导致患者体内胰岛素相对减少或活性减低引起体内糖、蛋白质、脂肪和水电解质代谢紊乱， 使肝糖原和肌糖原不能合成。临床表现为血糖升高， 尿糖阳性及糖耐量降低；随着病情和时间的延长， 容易并发全身微血管、大血管病变， 从而导致心、脑、肾、神经及眼等组织器官的慢性病变， 严重时会引起酮症酸中毒， 甚至危及生命。现代医学用于治疗2型糖尿病的药物主要有磺酰脲类、双胍类、α-葡糖苷酶抑制剂以及胰岛素增效剂。此类药物疗效肯定但是长期应用副作用较大（如低血糖反应及体重增加）。 　　多年来， 我国以中医药理论为指导， 采用现代科学技术，研制出大量治疗2型糖尿病的中药制剂。《中华人民共和国药典》（2000年版）与《部颁标准》中已收载的治疗2型糖尿病的中药制剂有：消渴灵片、渴乐宁（胶囊）、金芪降糖片、玉液消渴冲剂、养阴降糖片、降糖甲片、降糖舒胶囊、消渴降糖片、降糖胶囊、消渴降糖胶囊、消渴丸等，其中大多采用地黄进行组方。经研究证明，从地黄中提取出的地黄寡糖（Rehmannia glutinosa oligosaccharide， ROS）经腹腔注射对葡萄糖性及四氧嘧啶（ALX）糖尿病大鼠有确切的降血糖作用[1]；对去胸腺大鼠及老年大鼠受损的糖代谢（impaired glucose metabolism）有改善作用[2-3]，并且能改善糖尿病大鼠的肠道菌群[4]，但上述研究未涉及到2型糖尿病模型。 　　由于2型糖尿病占糖尿病患者90%以上，本课题将对ROS在2型糖尿病动物模型的降血糖作用及初步机制进行研究。地黄寡糖在2型糖尿病模型上对血糖水平、血脂水平有何影响，是本课题要研究的主要问题。在此基础上本课题还将对肝脏糖原生成及糖代谢中的关键酶之一的G-6-Pase活性进行研究，以探讨其作用机制。 　　1 资料与方法 　　1.1 实验动物 Wistar大鼠，体重180～220 g，雌性。由兰州军区兰州总医院动物实验中心提供。 　　1.2实验仪器 ISP-21半自动生化分析仪：荷兰产品；BP210S电子天平：宝多科斯有限公司生产；HP-8453紫外分光光度计：美国惠普公司生产；TGL-16G台式离心机：上海安亭仪器厂产品；YQ-3电动匀浆机：江苏金坛市医疗器械厂产品。 　　1.3 试剂 地黄寡糖（ROS）由兰州军区兰州总医院临床药理基地提供，其中四聚糖占60%，三糖占20%，其余为单糖或二糖[4]。葡萄糖-6-磷酸酶活性测定用显色试剂硫酸甲基对氨基苯酚[4-（Methylamino）phenol hemisulfate salt]购自SIGMA公司。链尿佐菌素（STZ）购自SIGMA公司。盐酸二甲双胍由正安医药（天津）有限公司生产，批号：020413。血糖检测试剂盒、总胆固醇（TC）检测试剂盒、甘油三酯（TG）检测试剂盒和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）检测试剂盒：均为四川迈克科技责任有限公司产品。钼酸铵、蒽酮、蔗糖、葡萄糖、三氯乙酸等试剂：均为国产分析纯。 　　1.4 方法 　　1.4.1 2型糖尿病胰岛素抵抗模型的建立：选用长期高脂肪饲料饲养加小剂量链脲佐菌素诱导大鼠2型糖尿病模型。高脂饲料的配方为：蛋黄2.5%、蔗糖20%、猪油10%、基础饲料67.5%。以上述饲料饲养2～3个月后再以STZ （3