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- 2018-08-28 发布于湖北
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用心 爱心 专心
选修一《生物技术实践》复习
一.传统发酵技术的应用
几种传统发酵技术的比较(了解原理即可)
菌种生
活方式
原理
发酵条件
操作提示
果
酒
酵母菌
兼性
厌氧型
C6H12O6 →2C2H5OH+ 2CO2
温度:18~25℃,最适温度为20℃
PH;5.0~6.0 呈酸性。
氧气:先期通O2,目的是使酵母菌大量繁殖,然后密闭发酵生产酒精。
选材和材料处理;防杂菌污染;控制发酵条件;正确使用发酵装置。
果
醋
醋酸菌
好氧型
C2H5OH+ O2→2CH3COOH+H2O
温度:30℃~35℃
腐
乳
毛霉
需氧型
蛋白酶
蛋白质→ 多肽、氨基酸、脂肪酶
脂肪→甘油、脂肪酸
温度为15~18 ℃,此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长。
防杂菌污染;控制盐、酒、辛香料用量;控制前、后期发酵条件。
泡
菜
乳酸菌
厌氧性
在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料
防杂菌污染,
密封严密。
选择气密性好的泡菜坛;控制腌制条件。
二.微生物的培养与应用
微
微
生
物
的
实
验
室
培
养
培养基
无菌技术
分离、纯化大肠杆菌菌
培养基的配制
配制培养基的原则
配制培养基的方法
计算→称量→溶化→调pH→分装→加棉塞→灭菌→倒平板
平板划线法
稀释涂布法
系列稀释
平板涂布
1.关于培养基
培养基的种类
①按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂后,制成琼脂固体培养基。
②按功能来分可分为选择培养基和鉴别培养基。
③按照人们对培养基中成分的了解程度可分为天然培养基和合成培养。
⑵培养基的营养
各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种营养物质。满足微生物生长还需要适宜的pH、氧气的要求(根据微生物的需求提供有氧或无氧环境)、特殊营养物质等。例如:培养乳酸杆菌需要将培养基的pH调至酸性,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。
2.常见微生物类群:原核生物{细菌(如大肠杆菌---二分裂.革兰氏阴性、异养兼性厌氧性肠道杆菌)、蓝藻、支原体、衣原体、放线菌等}、原生生物(草履虫、变形虫等)、真菌(酵母菌---出芽生殖.异养兼性厌氧性微生物、霉菌、食用菌)、病毒等。
3.无菌技术
对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒 ;将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌;为避免周围微生物污染,实验操作应在酒精灯火焰附近旁进行;避免已灭菌处理的材料用具与 周围物品相接触。
消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸消毒法,还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒等。
灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子。
灭菌方法
①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法;
②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱 ;
③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅 。
④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯 。
比较项
理化因素的作用强度
消灭微生物的数量
芽孢和孢子能否被消灭
消毒
较为温和
部分生活状态的微生物
不能
灭菌
强烈
全部微生物
能
4.培养基的配制原则:目的要明确:根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。营养要协调:培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。pH要适宜:细菌培养基pH中性或偏碱性,霉菌培养基呈酸性。
5.微生物的纯化
平板划线法:操作简单,但是单菌落不易分离
稀释涂布平板法:操作复杂,但是单菌落易分离
6.统计菌落数目的方法
测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落。
三.植物组织培养技术
1.理论基础和基本过程
离体的植物组织、器官或细胞当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时,在一定的营养物质、激素和其他外界条件的作用下,就可能表现出全能性,发育成完整的植株。基本过程如下:
离体的植物组织、器官或细胞
试管苗愈伤组织 组织培养 组织培养
试管苗
愈伤组织
脱分化 再分化
人为使用激素控制
2.影响的因素
内因:不同的植物组织,培养的难易程度差别很大,容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短也有影响。幼
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