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多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在临床中应用分析 　　【摘要】 目的 探讨多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统在临床应用中的价值。方法 100例临床常见的恶性肿瘤患者应用多肿瘤标志物蛋白芯片技术对患者的血清进行检测， 100例良性肿瘤患者的血清进行检测， 分析其灵敏度和特异性并对其进行比较两组的差异。结果 多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统对常见肿瘤患者100例进行检测， 呈阳性85例， 阳性率85%；对照组100例呈阳性9例， 阳性率9%。结论 多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统适宜于健康体检及肿瘤普查， 是临床检测肿瘤的有效手段。 　　【关键词】 恶性肿瘤；蛋白芯片；肿瘤标志物；应用分析 　　蛋白芯片检测技术是新研究领域的一种高灵敏度、高通量、高特异性且微型化的蛋白质分析技术[1]。本研究采用上海数康公司的HD2001A型生物芯片， 对已经确诊的100例恶性肿瘤患者和100例良性患者进行相关分析， 探讨在肿瘤临床诊断检测肿瘤标记物（TM）的联合应用价值， 为肿瘤患者的早期诊断和治疗提供精准的依据。 　　1 资料与方法 　　1. 1 一般资料 恶性肿瘤患者为本院2012年8月～2013年10月住院患者100例， 其中男62例， 女38例， 年龄34～79， 平均年龄（53.2±7.8）岁， 其中胃癌25例， 胰腺癌15例， 乳腺癌10例， 肺癌11例， 肝癌21例， 直肠癌8例， 结肠癌10例。对照组100例， 其中肝脏疾病32例， 肺部疾病20例， 消化道疾病26例， 妇科疾病14例， 前列腺疾病8例， 两组患者的一般资料差异无统计学意义（P0.05）， 具有可比性。 　　1. 2 方法 在患者空腹时采集外周血2 ml 对其离心分离血清， 分离后在4℃冰箱保存， 4 d左右取出检测。检测时将芯片的小方格内放入待测血清或标准品100 μl；恒温37 ℃， 30 min， 100 rpm 摇床振荡， 振荡后取出芯片弃去孔内液体；清洗后将芯片放入洗盒， 继续洗液， 37℃摇床， 250 rpm， 10 min振荡洗涤， 将弃去盒内液体；重复洗涤4次；芯片小方格内加 100 μl 反应液， 同样重复洗涤 4次；等体积将检测液 A 和 B 混合， 加入 20 μl 混合的检测液在膜表面， 通过蛋白芯片检测仪进行检测， 60 s后拍摄图像， 进行反应数据分析。 　　1. 3 结果判定[2] 根据C-12 检测系统12种肿瘤标志物的参考范围：神经元特异性烯醇化酶（NSE）13.0 ng/ml， 癌胚抗原（CEA）5.0 ng/ml， 糖类抗原125（CA125）35.0 U/ml， 糖类抗原242（CA242）20.0 U/ml， 铁蛋白（ferritin）219.0 ng/ml（女）、322.0 ng/ml（男）， 糖类抗原199（CA199）35.0 U/ml， 糖类抗原153（CA153）35.0 U/ml， 前列腺特异性抗原（PSA）5.0 ng/ml， 甲胎蛋白（AFP）20.0 ng/ml， 人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）3.0 ng/ml， 游离性前列腺特异性抗原（F-PSA）1.0 ng/ml， 生长激素（HGH）7.5 ng/ml。实验排除溶血、脂血标本。其他具体步骤要严格按照C-12上的使用说明书进行操作。 　　1. 4 统计学方法 采用统计学软件SPSS16.0对实验数据进行总结、处理， 计数资料采用χ2检验， P0.05表示差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　良性疾病组与恶性肿瘤组的阳性率比较， 恶性肿瘤组的阳性率明显比良性疾病组高（P0.05）。C-12 蛋白芯片对恶性肿瘤检测的阳性率85%， 灵敏度为82%。见表1。 　　表1 C-12蛋白芯片对各组的检测阳性率（n， %） 　　分组 例数 阳性 阳性率 　　恶性肿瘤组 100 85 85 　　胃癌 25 20 　　肺癌 11 9 　　肝癌 21 19 　　胰腺癌 15 12 　　乳腺癌 10 10 　　直肠癌 8 7 　　结肠癌 10 8 　　良性疾病组 100 9 9 　　肝脏疾病 32 3 　　肺部疾病 20 2 　　妇科疾病 14 1 　　消化道疾病 26 3 　　前列腺疾病 8 0 　　3 讨论 　　生物芯片是近年来医学界一个备受瞩目的医疗成果， 可以将人体的各项检测变得非常集中化， 而且可对人体内的细胞进行简单快速地解读。生物芯片主要就是采用了微细加工[3， 4]。双抗体夹心法的化学发光检测方法是多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统是基础， 12种肿瘤标志物的抗体被固相基质上包被， 将血清中对应的肿瘤标志物进行捕捉， 与第二抗体结合， 对其催化使其产生化学反应的光信号， 将芯片采取专门的芯片阅读仪对肿瘤标志物进行定量