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复方羊角片补充检验方法研究 　　【摘要】 目的建立复方羊角片补充检验方法。 方法用补充检验方法对复方羊角片进行异性有机物鉴别。 结果此补充检验方法可检出复方羊角片处方药材白芷的植物组织。 结论该方法操作简便、重现性好,可用于建立复方羊角片补充检验方法。 　　 【关键词】复方羊角片;补充检验方法;异性有机物 　　 　　复方羊角片收载于《卫生部药品标准中药成方制剂第八册》系由羊角镑片,加水煎煮二次,3 h/次,分次滤过,合并滤液,浓缩成膏;其余川芎等三味粉碎成粗粉,照流浸膏剂项下的渗漉法,以30%乙醇为溶剂,进行渗漉,至漉液无色或无生物碱反应为止,收集渗漉液,回收乙醇,浓缩成膏,与羊角膏及辅料适量混匀,制粒,干燥,压制成1000片,包糖衣,即得。药材全部提成浸膏加蔗糖和糊精制成,为全浸膏制剂,不应含有植物组织。本实验在对某企业生产的该药品进行质量检验时,检出了淀粉粒、草酸钙簇晶、导管、木栓细胞等异性有机物,该异性有机物判断为处方药材白芷的植物组织。针对该药品含有的异性有机物,本实验制定了补充检验方法,并进行了方法学研究。? 　　1 仪器与材料? 　　1.1 仪器 　　CX31RTSF型生物显微镜奥林巴斯株式会社生产100倍;CX41RTSF型生物显微镜奥林巴斯株式会社生产100倍/400倍。? 　　1.2 试药 　　甘油,沈阳市试剂五厂,分析纯,批号:0303031;冰醋酸,天津市化学试剂一厂,分析纯,批号:070925; 　　水合氯醛,北京市朝阳区八里庄化工制药厂,化学纯,批号:990802。? 　　1.3 白芷对照药材 　　白芷中国药品生物制品检定所批号:120945?200406。? 　　1.4 供试品 复方羊角片? 　　1.5 阴性样品 自制? 　　2 环境条件 　　温度:20℃,相对湿度:45%。? 　　3 专属性试验? 　　3.1 白芷对照药材显微特征 粉末黄白色。淀粉粒极多,为粉末的主体。单粒圆球形(较大者)、椭圆形或圆多角形,直径3~20μm,脐点十字状、裂缝状、点状、三叉状或星状,大粒层纹隐约可见;复粒较多,由2~12分粒组成,少数可至20粒以上(见图1)。草酸钙簇晶呈类圆形或圆簇状,半透明,直径6~18μm。网纹、梯纹及螺纹导管,直径18~75μm。木栓细胞呈类多角形,壁薄,木化。油管多已破碎,黄色。油管碎片旁的细胞中淀粉粒溶化后留有网格样痕迹。? 　　3.2 阴性试验 　　操作方法[1]:根据该标准的制法制作阴性样品,取阴性样品2片,除去包衣,研细,称取细粉0.1 g,加水10 ml使溶解,离心,弃去上清液,沉淀加水2 ml使溶解,摇匀,吸取混悬液1滴于载玻片上,,加甘油醋酸试液1滴,置显微镜100倍下,在盖玻片上按下图位置选取9个检查点检视。? 　　 　　 检验结果:9个检查点视野中均未检出任何植物组织(见图2)。 ? 　　3.3 供试品试验 操作方法[2]:取本品2片,除去包衣,研细,称取细粉0.1 g,加水10 ml使溶解,离心,弃去上清液,沉淀加水2 ml使溶解,摇匀,吸取混悬液1滴于载玻片上,加甘油醋酸试液1滴(片1)(见图3);另吸取混悬液1滴于载玻片上,加水合氯醛试液1滴,加热透化(片2)(见图4)。2张片分别置显微镜100倍下,在盖玻片上按阴性试验操作方法中的示意图选取9个检查点检视。 　　 　　 图1 白芷对照药材显微特征 　　图2 阴性样品显微特征 　　图3 甘油醋酸试液装片可见淀粉粒 　　图4 水合氯醛试液装片可见油管碎片? 　　 　　检验结果:片1在4个检查点视野中检出了淀粉粒,片2在3个检查点视野中检出了草酸钙簇晶、导管等植物组织。? 　　4 重复性试验 　　操作方法:取本品溶化性检查的溶液静置数分钟,待混悬物沉降后,倾去上清液,剩余约30 ml溶液,离心,弃去上清液,沉淀加水2 ml使溶解, 混匀。吸取混悬液1滴于载玻片上,加甘油醋酸试液1滴,同法制作6张显微片(片1~6);另吸取混悬液1滴于载玻片上,加水合氯醛试液1滴,加热透化,同法制作6张显微片(片7~12),分别置显微镜100倍下,在盖玻片上按阴性试验操作方法中的示意图选取9个检查点检视。 　　检验结果: 　　片1 2个检查点检出植物组织(淀粉粒) 　　片2 3个检查点检出植物组织(淀粉粒) 　　片3 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶) 　　片4 2个检查点检出植物组织(淀粉粒) 　　片5 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶) 　　片6 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶) 　　片7 3个检查点检出植物组织(淀粉粒、草酸钙簇晶) 　　片8 2个检查点检出植物组织(木栓细胞、油管) 　　片9 2个检查点检出植物组织(